TissueLyser II自動(dòng)化樣品破碎

用于中到高通量樣本破碎，適用于分子分析

• 破碎過程便利、安全
• 適配器專為高通量破碎而優(yōu)化
• 提供多種配件
• 確保難裂解組織獲得高重復(fù)性結(jié)果
• QIAGEN樣本處理體系的重要組成部分

通過不銹鋼珠、碳化鎢珠或玻璃珠在塑料樣品管中的高速震動(dòng)，TissueLyser II可同步破碎多個(gè)生物樣本。借助適當(dāng)?shù)倪m配器，可同時(shí)處理48或192個(gè)樣本。也可使用研磨罐處理大體積樣本。同時(shí)提供各種研磨珠、研磨珠分配器、收集管及管蓋。TissueLyser II包括適配器在內(nèi)的所有配件與TissueLyser（已停產(chǎn)）兼容。

可靠檢測(cè)miRNA。

將大鼠腎臟置于RNAlater RNA Stabilization Reagent中穩(wěn)定，使用TissueLyser II，在QIAzol Lysis Reagent中25 Hz破碎25 mg樣本2 x 5分鐘。使用miRNeasy Mini Kit，采用手動(dòng)步驟 (Manual) 或在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀 (QIAcube) 上進(jìn)行自動(dòng)化處理，純化包含miRNA的總RNA。使用miScript System進(jìn)行Real-time RT-PCR，檢測(cè)2種不同的miRNA——miR-16和miR-25。

高效破碎動(dòng)物組織。

冷凍 (Frozen) 組織 (20 mg) 或?qū)⑵渲糜赗NAlater RNA Stabilization Reagent (RNAlater) 中穩(wěn)定，然后使用TissueLyser II破碎 (肝臟和肌肉破碎2 x 2分鐘；皮膚破碎2 x 5分鐘)。使用RNeasy Mini Kit (肝臟)、RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (皮膚) 或RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (肌肉) 純化RNA。[A] 采用1.2 %的甲醛瓊脂糖凝膠分析顯示了清晰的核糖體RNA條帶，表示具有完整的RNA。[B] 利用A₂₆₀ nm吸光度測(cè)量，定量RNA產(chǎn)量。

從植物組織中純化RNA具有可重復(fù)性。

使用TissueLyser II破碎冷凍的植物葉子 (2 x 1分鐘)。使用RNeasy Plant Mini Kit純化RNA，并在1.2 %的甲醛瓊脂糖凝膠上進(jìn)行分析。核糖體RNA條帶清晰均勻，表示可重復(fù)純化出完整的RNA。T：番茄 (100 mg)；A：擬南芥 (25 mg)；C：棉花 (100 mg)；M：玉米 (100 mg)；R：油菜 (100 mg)。

從動(dòng)物組織中純化DNA，具有可重復(fù)性。

將一只大鼠的心臟切成96 x 25 mg的小塊，然后使用TissueLyser II破碎 (2 x 15秒)。在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上使用DNeasy Blood & Tissue Kit (采用Reagent DXzui大程度減少裂解起泡現(xiàn)象) 進(jìn)行自動(dòng)DNA純化。48個(gè)樣本的瓊脂糖凝膠分析顯示了各樣本中的DNA量*。M：分子量標(biāo)準(zhǔn)。

從動(dòng)物組織中純化完整的蛋白。

將組織樣本(50 mg) 置于Mammalian Cell Lysis Buffer中預(yù)冷至4°C，使用TissueLyser II 20 Hz破碎3 x 90秒。使用針對(duì)∝-tubulin、β-actin和GAPDH的抗體對(duì)裂解物 (15 μg) 進(jìn)行western印跡分析。同時(shí)分析純化的蛋白質(zhì) (1 μg、100 ng和10 ng)，作為陽性對(duì)照。Lu：肺；He：心臟；Sp：脾；Li；肝；Ki：腎；Br：腦；Th：胸腺。

從革蘭氏陽性菌中純化RNA，具有可重復(fù)性。

使用RNAprotect Bacteria Reagent穩(wěn)定B. subtilis培養(yǎng)物。使用TissueLyser II，在裂解緩沖液中30 Hz破碎單個(gè)樣本 (各2.5 x 10⁸個(gè)細(xì)胞) 5分鐘。使用RNeasy Protect Bacteria Mini Kit純化總RNA，并在甲醛瓊脂糖凝膠上進(jìn)行分析。

TissueLyser II.

Performance

TissueLyser II尤其適合高通量的樣本破碎，適用于人類、動(dòng)物和植物組織、細(xì)菌和酵母?？杉兓@得高品質(zhì)的DNA、RNA、miRNA和蛋白質(zhì)，甚至對(duì)于難裂解的組織也具有高度的可重復(fù)性（參見"Efficient disruption of animal tissues"、"Reproducible RNA purification from plant tissues"、"Reproducible DNA purification from animal tissue"、"Purification of intact protein from animal tissue"、"Reproducible RNA purification from Gram-positive bacteria"和"Reliable detection of miRNAs"）。

Principle

基因分型、基因表達(dá)分析和蛋白質(zhì)組學(xué)研究均要求對(duì)生物樣本進(jìn)行高效破碎，以確保獲得高產(chǎn)的DNA、RNA和蛋白質(zhì)。TissueLyser II體系通過研磨珠的高速震蕩來實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本的有效破碎。TissueLyser II可快速、*的破碎樣本，*釋放生物分子，并可同時(shí)對(duì)樣本進(jìn)行勻，協(xié)助后續(xù)使用的QIAGEN試劑盒進(jìn)行純化（參見"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。

QIAGEN提供從樣本收集到DNA、RNA和蛋白質(zhì)純化的完整解決方案，TissueLyser II是其中關(guān)鍵的組成部分。TissueLyser II可作為QIAsymphony SP等QIAGEN自動(dòng)化儀器高通量制備和分析樣本的補(bǔ)充（參見"QIAGEN high-throughput automation"）。這一即用型儀器可從1–96個(gè)樣本中自動(dòng)純化DNA、RNA和蛋白質(zhì)。TissueLyser II也適用于QIAGEN手動(dòng)樣本制備試劑盒（參見"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。

進(jìn)行RNA研究時(shí)，新鮮收集的組織可在RNAlater RNA Stabilization Reagent中穩(wěn)定，可有效避免操作過程中RNA的降解。對(duì)于需要純化DNA、 RNA和蛋白質(zhì)的應(yīng)用，可使用Allprotect Tissue Reagent，將新鮮收集的組織中的待分析物迅速穩(wěn)定。

QIAGEN高通量自動(dòng)化儀器 >

Procedure

TissueLyser Adapter Sets使用微型收集管，可處理多達(dá)2 x 96個(gè)樣本，或使用2 ml微型離心管，處理多達(dá)2 x 24個(gè)樣本。如果在樣本破碎過程中不使用裂解緩沖液，則需要將適配器置于–80°C環(huán)境中預(yù)冷。在破碎時(shí)樣品管需保持密封，以避免交叉污染，這對(duì)于real-time RT-PCR或芯片分析等高敏感性的下游應(yīng)用尤其重要。根據(jù)樣本類型不同，破碎使用不銹鋼珠、碳化鎢珠或玻璃珠進(jìn)行。TissueLyser Bead Dispensers用來方便的將單個(gè)珠子加入到離心管中，或同時(shí)將96個(gè)研磨珠加入到收集管中。TissueLyser II也可配合Grinding Jar Sets使用，破碎大體積樣本。

Applications

TissueLyser II自動(dòng)化樣品破碎每批可處理多達(dá)192個(gè)樣本，因此是遺傳學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究中獲得生物信息的理想解決方案。TissueLyser II是新一代高通量測(cè)序的shou選破碎儀器。TissueLyser II可與多種QIAGEN樣本純化試劑盒配套使用，樣本純化可以手動(dòng)進(jìn)行，也可以在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀、QIAsymphony SP核酸提取純化分析儀、EZ1 Advanced、BioRobot或BioSprint工作站上自動(dòng)進(jìn)行。