操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。

自備物品：

15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器

比色皿：用于比色的容器

96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器

分光光度儀：用于比色分析

酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃

準(zhǔn)備物品

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

定量PCR方法：

a、競(jìng)爭(zhēng)法

選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板。在同一反應(yīng)管中，待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段，而待測(cè)模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測(cè)定熒光強(qiáng)度，根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù)。

b、內(nèi)參照法

在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí)，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板。

c、PCR－ELISA法

利用di高辛或等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合，再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn)，若加入內(nèi)標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的。

使用方法：

一、樣品采集：

1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。

2、血液樣品：用抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。

3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

二、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。

2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。

4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

全反式-β-阿林胡蘿卜 96%蟲草  98%豬脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒

3-氨基吡啶 分析標(biāo)準(zhǔn)品大黃酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%豬脂肪合成(FAS)免疫試劑盒

氨基蝶呤 98%雙醋瑞因 ≥95%（HPLC)豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒

草高鐵銨 98%黃豆原 98%豬脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒

殺草強(qiáng)  分析標(biāo)準(zhǔn)品大黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥96.0% (HPLC)豬脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒

烯基, 含穩(wěn)定劑銅, 97%漆黃 98%豬脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒

2,2′-聯(lián)氨-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺）二鹽 98%甲溶液 ACS,37 wt. % in H2O, 含10-15% 甲穩(wěn)定劑豬正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)免疫試劑盒

4-氨基-3-羥基苯甲 98%京尼平甙  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%豬粘膜血管地址黏附分子1(MADCAM1)免疫試劑盒

亞硫銨 94%乙二溶液  40 wt. % in H2O (8.8 M)豬粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒

氨基胍碳?xì)潲} 分析標(biāo)準(zhǔn)品甘草  93%豬粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)免疫試劑盒

順式-烏頭 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%氫加蘭他敏 98%豬粘蛋白/粘液2(MUC2)免疫試劑盒

N-（4-氨酰）-L-谷氨 97%二氫黃酮甙 97%豬粘蛋白/粘液1(MUC1)免疫試劑盒

花生四烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.0% (GC)和厚樸酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品豬早老2(PS-2)免疫試劑盒

腺-5'-磷 from yeast, ≥97%和厚樸酚 ≥98% (HPLC)豬早老1(PS-1)免疫試劑盒

對(duì)氨基苯胂 分析標(biāo)準(zhǔn)品酚 97%豬載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒
志賀氏菌核酸檢測(cè)試劑盒48T促甲狀腺（TSH）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人(R)-(+)-1-Boc-3-氨基吡咯烷2號(hào)染色體開放閱讀框88抗體

CBZ-L-丙氨瑞舒伐他汀鈣G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體

小鼠心鈉肽（ANP）ELISA試劑盒,4-(4-苯基)-6-異基-2-[(N-甲基-N-甲磺酰)氨基]嘧啶-5-甲激活受體1B抗體

EB病IgM（EBv IgM）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人4-(4-苯基)-6-異基-2-[(N-甲基-N-甲磺酰)氨基]嘧啶-5-甲雄激受體相關(guān)蛋白24抗體

糖皮質(zhì)激受體α（GR-α）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人3-氨基噻吩-2-酰淀粉樣肽前體蛋白抗體（C端）

小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2（IGFBP-2）ELISA試劑盒,3-氨基噻吩-2-酰腺環(huán)化2抗體

小鼠泛蛋白（Ub）ELISA試劑盒,酞菁藍(lán)B載脂蛋白C3抗體

小鼠內(nèi)（ET）ELISA試劑盒,酞菁藍(lán)B載脂蛋白E4抗體