【產(chǎn)品名稱】DMSO二甲基亞砜

【產(chǎn)品規(guī)格】100ml

【產(chǎn)品品牌】sigma

【產(chǎn)品庫存】現(xiàn)貨

【產(chǎn)品簡介】DMSO二甲基亞砜是一種滲透性保護劑，用途廣泛，能夠降低細胞冰點，減少冰晶的形成，減輕自由基對細胞損害，改變生物膜對電解質、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。

【產(chǎn)品應用】二甲基亞砜是一種用于化學反應（如聚合酶鏈式反應 (PCR)）的極性非質子溶劑，也可作為冷凍保護玻璃化劑用于保存細胞、組織和器官。DMSO 可在細胞冷凍培養(yǎng)基中用于保護細胞免受冰晶導致的機械損傷。它可用于原代、繼代培養(yǎng)和重組的異倍體和雜交瘤細胞系、胚胎干細胞 (ESC) 以及造血干細胞的凍存。DMSO 常與 BSA 或胎牛血清 (FBS) 一同使用。

【注意】在室溫下容易過冷并緩慢重融。 固化產(chǎn)品可以通過加熱至室溫來重新液化，而不會損害產(chǎn)品。用的時候要避免其揮發(fā)，因此需要準備1%-5%的氨水備用。若皮膚不慎沾上后，可用大量的清水及稀氨水沖洗。                   

【凍存程序】

 以下程序適用于大多數(shù)細胞，如果必要，可以適當調整。凍存培養(yǎng)基的配方請參考其細胞說明書。

1.凍存前先檢測細胞是否受到細菌、真菌、支原體和病毒的污染。通常凍存后10-14天才能得到污染檢測結果，如果確定有污染，應將該細胞銷毀。

2.凍存培養(yǎng)基由wan全培養(yǎng)基和5% DMSO（sigma D2650）組成。由于DMSO的溶解會放熱，所以不能向細胞懸液中直接加入未稀釋的DMSO。

3.以溫和速度（125g×10 min）離心收集細胞，并以1×10*6-5×10*6活細胞/ml的密度重懸細胞。繼續(xù)培養(yǎng)細胞直到復蘇后細胞活性得以確定。

4.在凍存管上標記好細胞名稱，編號和凍存日期等信息。然后每管加入1-1.8 ml細胞懸液（視凍存管體積）并密封。

5.室溫條件下，將細胞在凍存培養(yǎng)基中平衡15-40 min（勿超）。這段時間中，可以將細胞懸液等分加入凍存管中。40min后，細胞活性可能會受到DMSO的影響而下降。

6.將凍存管置于已預冷至4℃的程序降溫盒，并將降溫盒置于-70℃（或更冷）的冰箱中至少24小時?；蛘?，使用已預冷至4℃的可編程電子降溫系統(tǒng)以1℃/min的速度將凍存管降溫至-40℃以下，然后迅速降至-130℃。

7.將凍存管迅速轉移至液氮罐或者-130℃冰箱。通常，冷凍的細胞會以10℃/min的速度升溫，一旦達到-50℃以上，細胞會劇烈受損。

8.記錄凍存位置和過程細節(jié)等信息。

9.置于-130℃ 24小時后，取出一只凍存管并復蘇，以測定細胞活性和是否污染。