【預(yù)期用途】
本試劑盒主要目的是測(cè)定豬血清中豬藍(lán)耳病毒抗
體，可用于評(píng)估感染豬的血清學(xué)診斷以及豬藍(lán)耳病毒
疫苗免疫狀況分析。

【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒應(yīng)用固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）
原理，由包被有高純度的豬藍(lán)耳病毒抗原的微孔反應(yīng)
板、辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗豬 IgG 及其它試劑配套
組成。其反應(yīng)機(jī)理為包被抗原與樣本中的 PRRSV-Ab
結(jié) 合 ， 再 與 酶 標(biāo) 抗 豬 IgG 抗 體 形 成 “ 包 被 抗 原
+PRRSV-Ab+酶標(biāo)抗豬 IgG 抗體”復(fù)合物，加入顯色劑，
通過酶催化反應(yīng)顯色。顯色深淺與 PRRSV-Ab 的量成
正比，當(dāng)樣本反應(yīng)顯色后，經(jīng)酶標(biāo)儀檢測(cè)所得結(jié)果超
過設(shè)定的臨界值時(shí)結(jié)果判為陽(yáng)性，即表明免疫產(chǎn)生了
抗體或有自然感染存在。

【自備器材】
1．酶標(biāo)儀，雙波長(zhǎng) 450/630 nm 濾光片
2．微量移液器（單道 10-100 μl、0.5-10 μl、多道 30-300
μl）
3．水浴箱或恒溫箱
4．微量振蕩器
5．一次性槍頭（10 μl，200 μl）
6．去離子水

【樣本要求】
1．本試劑檢測(cè)的樣本為豬血清，樣本應(yīng)無菌采集，2 ℃
－8 ℃貯存應(yīng)不超過一周，長(zhǎng)期應(yīng)在－20℃以下保存。
2．避免使用嚴(yán)重溶血、有沉淀物、含懸浮纖維蛋白及
污染長(zhǎng)菌的血清樣本。

【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】
1．試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實(shí)驗(yàn)前，先取
出置室溫 30 min，可以獲得最佳結(jié)果。
2．樣本稀釋：用試劑盒提供的樣本xishi液將樣本作
40 倍稀釋（例:將 5 μl 樣本加至 195 μl 樣本xishi液中）。
3．配制洗滌液：將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去
離子水稀釋 10 倍（例：將 10 ml 洗滌液加入 90 ml 去
離子水中）。若 10 倍濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶，屬正?，F(xiàn)
象，放置 37 ℃至溶解后即可。

【檢驗(yàn)方法】
1. 加樣：根據(jù)樣本數(shù)量，取所需板條，檢測(cè)時(shí)，設(shè)陰、
陽(yáng)性對(duì)照各 2 孔，分別加入不用稀釋的陰、陽(yáng)性對(duì)照
血清 100 μl 于相應(yīng)孔中（可不設(shè)空白對(duì)照）。其余為
樣本孔，每孔加 100 μl 用樣本xishi液稀釋好的樣本。
2. 溫育：加樣后，蓋上蓋板膜，置 37 ℃溫育 30 min。
3. 洗板：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿反應(yīng)板孔，靜
置 10 s，直接甩出，洗滌 3 次，最后一次洗滌后吸干
板內(nèi)液體。
4. 加酶：每孔加酶標(biāo)記物 100 μl。
5. 溫育：加好酶標(biāo)記物的反應(yīng)板蓋好蓋板膜，置 37 ℃
溫育 30 min。
6. 洗板：同步驟 3。
7. 顯色：每孔加顯色劑 100 μl，振蕩混勻，37 ℃避光
反應(yīng) 10 min。
8. 終止：每孔加終止液 50 μl，振蕩 10 s，充分混勻，
終止后即讀數(shù)。
9. 讀數(shù)：以 450 nm/ 630 nm 雙波長(zhǎng)檢測(cè)，讀取各孔吸
光度值（OD 值）。充分混勻，終止后即讀數(shù)。

【注意事項(xiàng)】
1.請(qǐng)?jiān)谑褂迷噭┖兄?，仔?xì)閱讀說明書。
2．請(qǐng)不要使用過期的試劑盒組分，不要將不同批次的
組分混合使用。
3．本試劑盒應(yīng)按含有傳染性材料對(duì)待，試驗(yàn)廢棄物應(yīng)
經(jīng) 121 ℃高壓蒸汽滅菌 30 min，或用 5.0 g/L 次氯酸鈉
等消毒劑處理 30 min 后廢棄。
4．未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封
2 ℃-8 ℃保存。未用完的液體試劑應(yīng)蓋好瓶蓋，與其
它配套組份放入試劑盒中于 2 ℃-8 ℃避光保存。
5．應(yīng)用微量移液器加入樣本及試劑，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)
確性。
6．加洗滌液時(shí)應(yīng)做到滿而不溢，防止孔口有游離酶不
能洗凈或各孔間的交叉污染。
7．終止液有腐蝕性，若濺到皮膚或衣物上應(yīng)立即用大
量清水沖洗干凈。

【儲(chǔ)存條件及有效期】
于 2 ℃－8 ℃避光保存，防止冷凍，有效有效期 12
個(gè)月。

【生產(chǎn)日期及批號(hào)】
詳見包裝袋和外包裝盒。