大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)是目前應(yīng)用廣泛，也是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。E. coli具有遺傳背景清楚、細(xì)胞增殖快、表達(dá)量高、穩(wěn)定性好和抗污染能力強(qiáng)等特點(diǎn)，適用于多種屬蛋白的表達(dá)，尤其對(duì)小分子蛋白的生產(chǎn)具有極大的優(yōu)勢(shì)，但也存在一些問(wèn)題，如易形成包涵體和含有內(nèi)毒素等。義翹神州提供從密碼子優(yōu)化到重組蛋白表達(dá)/純化的一站式服務(wù)以及內(nèi)毒素去除等附加服務(wù)，以滿足不同的定制需求。我們擁有豐富的E. coli 可溶性蛋白表達(dá)/純化及蛋白復(fù)性經(jīng)驗(yàn)，擁有多種E. coli細(xì)胞株和表達(dá)載體，可為客戶提供優(yōu)質(zhì)的原核蛋白表達(dá)服務(wù)。

E. coli 蛋白表達(dá)服務(wù)內(nèi)容

• 附加服務(wù)
為滿足客戶的特定需求，義翹神州還提供更加廣泛的服務(wù)，包括：內(nèi)毒素去除服務(wù)、標(biāo)簽去除服務(wù)、蛋白標(biāo)記服務(wù)。

原核蛋白表達(dá)服務(wù)流程

大腸桿菌蛋白表達(dá)服務(wù)案例

案例 #1: 在大腸桿菌（E. coli）中表達(dá)可溶性無(wú)標(biāo)簽蛋白

三步法進(jìn)行蛋白純化（基于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)、疏水性和分子量）

1st step:                     Protein Purification by SP-FF	2nd step:                     Protein Purification by HIC-FF	3rd Step:                     Protein Purification by SEC

• 案例 #2: 在大腸桿菌（E. coli）中表達(dá)目的蛋白

義翹神州按照客戶要求，采用原核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行目的蛋白的表達(dá)和純化，成功交付了純化蛋白和質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (CoA)。相關(guān)的SEC-HPLC、SDS-PAGE和細(xì)胞活性分析結(jié)果如下所示。

SEC-HPLC>98.5%	Reducing SDS-PAGE>95%	Cell bioactivity: EC50=17pg/mL

原核蛋白表達(dá)的常見(jiàn)問(wèn)題解答

• 什么情況下建議選擇大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)？
  大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是常用的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，優(yōu)勢(shì)包括遺傳背景清晰、成本低、表達(dá)量高、易于放大和時(shí)間短等，缺點(diǎn)是容易形成包涵體和無(wú)法進(jìn)行翻譯后修飾。該系統(tǒng)適用于表達(dá)原核來(lái)源的蛋白或不需要翻譯后修飾的真核來(lái)源蛋白，特別是小分子蛋白。如果您感興趣的蛋白符合這種情況，建議選擇原核表達(dá)系統(tǒng)。

• 在大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)中，義翹神州能解折疊不溶蛋白嗎？
  是的。我們的科學(xué)家在蛋白質(zhì)解折疊方面擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)。選擇哪種蛋白解折疊策略需要根據(jù)蛋白質(zhì)的序列和結(jié)構(gòu)特性來(lái)確定。

• 義翹神州提供標(biāo)簽去除服務(wù)嗎？
  是的。我們構(gòu)建載體時(shí)可以在標(biāo)簽蛋白和目的蛋白之間加上蛋白酶的酶切位點(diǎn)，這樣純化后就可以利用蛋白酶去除標(biāo)簽，得到完整的目的蛋白。蛋白酶的切割效率受目的蛋白的影響，具體由實(shí)驗(yàn)結(jié)果而定。

• 密碼子優(yōu)化可以提高蛋白表達(dá)水平嗎？
  一般來(lái)說(shuō)，經(jīng)過(guò)密碼子優(yōu)化后，蛋白的表達(dá)水平會(huì)變高。 因此，我們也提供密碼子優(yōu)化服務(wù)。