病毒斑檢測(cè)試劑盒
- 公司名稱 武漢艾美捷科技有限公司
- 品牌 Cell Biolabs
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2025/2/27 13:18:49
- 訪問(wèn)次數(shù) 8
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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噬斑測(cè)定法于1952年開(kāi)發(fā),是第一個(gè)用于定量病毒濃度的方法。該方法由Renato Dulbecco改進(jìn),允許手動(dòng)確定含有具有復(fù)制能力的溶菌性病毒顆粒的樣本中的噬斑形成單位(PFU)數(shù)量。
噬斑測(cè)定需要使用對(duì)目標(biāo)病毒易感的培養(yǎng)細(xì)胞。細(xì)胞首先被接種到一個(gè)可以附著和生長(zhǎng)的表面上,然后過(guò)夜培養(yǎng)以形成完整的單層細(xì)胞。隨后,將病毒樣本進(jìn)行多次稀釋,并將每個(gè)稀釋度的樣本加入到細(xì)胞的培養(yǎng)皿或孔中。經(jīng)過(guò)一段孵育期,病毒附著到目標(biāo)細(xì)胞上后,移除接種液。然后,培養(yǎng)物被覆蓋一層含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,以及一種能夠形成凝膠或半固體覆蓋層的物質(zhì),如瓊脂糖或甲基纖維素。進(jìn)入細(xì)胞并復(fù)制的感染性病毒顆??梢杂|發(fā)子代病毒顆粒的釋放。凝膠限制了顆粒的運(yùn)動(dòng),使得新產(chǎn)生的病毒只能感染鄰近的細(xì)胞。當(dāng)病毒殺死感染的細(xì)胞時(shí),死亡(或垂死)的細(xì)胞會(huì)脫落,從而在細(xì)胞單層中形成一個(gè)孔洞。這個(gè)細(xì)胞缺失的區(qū)域稱為噬斑,表現(xiàn)為生長(zhǎng)表面上的圓形斑點(diǎn)。
Cell Biolabs的病毒噬斑測(cè)定試劑盒提供了一個(gè)準(zhǔn)確的系統(tǒng),用于測(cè)定溶菌性病毒的感染性滴度。試劑盒提供的試劑足以在12孔板中進(jìn)行最多120次滴定實(shí)驗(yàn)。
作為Cell Biolabs全國(guó)總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品病毒斑檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 詳情 |
病毒斑檢測(cè)試劑盒 | VPK-5191 | 查看 |
病毒斑檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理:
第一天:在12孔或6孔板中接種細(xì)胞
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第二天:用目標(biāo)病毒的系列稀釋液感染細(xì)胞,并添加覆蓋培養(yǎng)基。在顯微鏡下觀察噬斑的形成
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第四天至第十六天:固定和染色細(xì)胞
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計(jì)數(shù)陽(yáng)性噬斑并計(jì)算病毒滴度
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試劑盒組成(常溫運(yùn)輸)
1. CytoSelect?瓊脂粉(部件號(hào)113001):一瓶1.2克
2. 10倍固定液(部件號(hào)51911A):一瓶20毫升
3. 細(xì)胞染色液(部件號(hào)51912A):一瓶30毫升
未提供材料
1. 目標(biāo)細(xì)胞和病毒
2. 2倍細(xì)胞培養(yǎng)基和無(wú)菌DPBS
3. 無(wú)菌細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)水
4. 微波爐或加熱塊
5. 水浴鍋
6. 顯微鏡
保存方法
將所有試劑盒組分保存在室溫下。
結(jié)果示例
以下圖表展示了典型的滴定結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考,不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。
圖:流感A型和B型病毒在MDCK細(xì)胞中的噬斑測(cè)定
使用不同稀釋度的流感A型(A面板)和B型(B面板)病毒培養(yǎng)液感染MDCK細(xì)胞72小時(shí)。
文獻(xiàn)參考:
1. Baer, A. & Kehn-Hall, K. (2014) Viral concentration determination through plaque assays: using traditional and novel overlay systems. J. Vis. Exp. 93, 52065.
2. Wen, Z. et al. (2019) Development and application of a higher throughput RSV plaque assay by immunofluorescent imaging. J. Virol. Methods 263, 88–95.
3. Mendoza, E. J., Manguiat, K., Wood, H. & Drebot, M. (2020) Two detailed plaque assay protocols for the quantification of infectious SARS-CoV-2. Curr. Protoc. Microbiol. 57, cpmc105.
4. Blaho, J. A., Morton, E. R. & Yedowitz, J. C. (2006) Herpes simplex virus: propagation,quantification, and storage. Curr. Protoc. Microbiol. 14, E.1.1–E.1.23.
5. Cruz, D. J. M. & Shin, H.-J. (2007) Application of a focus formation assay for detection and titration of porcine epidemic diarrhea virus. J. Virol. Methods 145, 56–61.
Cell Biolabs公司位于美國(guó)加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈(San Diego),是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌,作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商,為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的g端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。
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