軍團菌抗體ELISA檢測試劑盒
(美國DRG*:貨號,EIA2814;規(guī)格,96T)
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1、適用范圍
作為一種輔助手段用于定性檢測人血清中軍團菌總抗,屬于體外診斷試劑。在美國僅用于科研。
2、實驗原理
微孔板中包被著激活的軍團菌抗原,實驗過程包含三步
- 待測血清在包被板中的反應。血清中特異性抗體可與包被板中的抗 原結合,洗板除去未結合樣品。
- 加入酶聯羊抗人IgA/M/G,酶聯物可與上步中結合到包被板的抗體反應,洗板。
- 底物液顯色反應,通過顏色變化,可判斷其抗體的含量。
3、試劑組成
名稱 | 規(guī)格 |
微孔條 | 包被軍團菌抗原(1-6組) 12 X 8孔 |
酶聯物 | 1×15ml/瓶標記有HRP羊抗人軍團菌IgG/M/A抗體白色蓋子 |
陽性質控 | 1×0.35ml/瓶 紅色蓋子 |
標準品 | 1×0.5ml/瓶 藍色蓋子 |
陰性質控 | 1×0.35ml/瓶 綠色蓋子 |
樣品稀釋液 | 1×30ml/瓶 |
底物顯色液 | 1×15ml/瓶含TMB |
濃縮洗滌液(10X) | 1×100ml/瓶 |
終止液 | 1×15ml/瓶1M的硫酸 |
4、試劑儲存保存于2-8℃,稀釋后的洗滌液可在室溫保存一周
5、樣品收集和準備靜脈穿刺取血,避免交叉感染,禁止使用溶血,污染血液樣品。血液樣品在室溫下不得超過8小時,2-8℃保存不得超過48小時,如需保存更長時間需在-20℃或者更低的溫度下凍存。
6、實驗所需材料儀器但本試劑盒未提供酶標儀
微量移液管10ul和200ul
多通道移液器(50-200ul)
去離子水
塑料洗瓶
加樣槍頭
量筒
紙巾
7、實驗步驟(1)、將試劑盒內各成份平衡至室溫。
(2)、確定所需的微孔條將其固定在板架上。(1個空白孔,1個陰性質控孔,3個標準品孔,1個陽性質控孔)
(3)、按照1:21對樣品,陰性質控,標準,陽性質控進行稀釋(10ml血清+200ml的樣品稀釋液)
(4)、加入100ul樣品稀釋液于A1孔作為空白孔,每孔分別加入100ul稀釋后
的質控,標準及樣品。
(6)、室溫(20-25℃)反應25±5分鐘
(7)、洗板5次
(8)、每孔加入100ul的酶聯物
(9)、室溫(20-25℃)反應25±5分鐘
(10)、洗板5次
(11)、每孔加入100ul的底物液
(12)、室溫下反應10-15分鐘
(13)、每孔加入50ul終止液
(14)、30分鐘內酶標儀讀數
觀察結果,或者在450nm/620-650nm處讀數
注意:洗滌時要反復洗滌五次8、結果說明CUTOFF OD值=參比品OD x 相關因子(CF)
CF值在每個試劑盒上注明。
陰性樣品:樣本OD/CUTOFF OD ≤ 0.90
灰色區(qū)域:0.91<樣本OD/CUTOFF OD<1.09
陽性樣品:樣本OD/CUTOFF OD≥ 1.10
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