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KTB4213Mouse Anti-rat IgG 小鼠抗大鼠IgG (親和層析純化)
Mouse Anti-rat IgG  小鼠抗大鼠IgG      (親和層析純化)
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Mouse Anti-rat IgG 小鼠抗大鼠IgG (親和層析純化)

親和純化二抗IgG

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多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:
  1、制備抗原。  
 2、選擇實驗動物。
  3、動物免疫。  
 4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。
  5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。
  6、純化出抗體。  
 7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
  單克隆抗體:
 ?。╩onoclonal antibody,McAb)克隆選擇學說:淋巴細胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,一種細胞帶一種受體,進入機體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個別淋巴細胞,使之活化,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細胞群,分泌同樣的抗體。當抗原進入體內(nèi),在機體中就會誘導出針對不同抗原決定簇的多種抗體,如果要把這些抗體一一分開,用現(xiàn)有的生物化學或物理化學方法是根本辦不到的。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細胞與腫瘤細胞融合,培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細胞。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細胞(Plasmacytoma),開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,兔單抗具有:首先,兔抗血清通常含有高親和力抗體,可以比鼠抗血清識別更多種類的表位;其次,兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原;第三,由于兔脾臟較大,可以更多進行的融合試驗,使得高通量篩選融合成為可能。
抗體規(guī)律:
  (1)初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體:當抗原*次進入機體時,需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體,且抗體產(chǎn)生的量也不多,在體內(nèi)維持的時間也較短。
 ?。?)再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體:當相同抗原第二次進入機體后,開始時,由于原有抗體中的一部分與再次進入的抗原結(jié)合,可使原有抗體量略為降低。隨后,抗體效價迅速大量增加,可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍,在體內(nèi)留存的時間亦較長。
  (3)回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體:由抗原刺激機體產(chǎn)生的抗體,經(jīng)過一定時間后可逐漸消失。此時若再次接觸抗原,可使已消失的抗體快速上升。如再次刺激機體的抗原與初次相同,則稱為特異性回憶反應(yīng);若與初次反應(yīng)不同,則稱為非特異性回憶反應(yīng)。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時性的,短時間內(nèi)即很快下降。
抗體的功能:
  抗體的主要功能是與抗原(包括外來的和自身的)相結(jié)合,從而有效地清除侵入機體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物,抗體(antibody)是一種應(yīng)答抗原產(chǎn)生的、可與抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。每種抗體與特定的抗原決定基結(jié)合。這種結(jié)合可以使抗原失活,也可能無效但有時也會對機體造成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產(chǎn)生,對人體可造成危害。
抗體的親和力 :
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol,通常K的范圍在 108 ~1010 /mol,也有多達 1014 /mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。


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