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【簡(jiǎn)單介紹】
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相關(guān)知識(shí)>>>>>

多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:
  1、制備抗原。  
 2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
  3、動(dòng)物免疫。  
 4、試取血進(jìn)行測(cè)試,看看是否成功免疫。
  5、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清。
  6、純化出抗體。  
 7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
 
 標(biāo)記抗體:
   抗體經(jīng)過(guò)酶標(biāo)記、鐵蛋白標(biāo)記或通過(guò)膠體金標(biāo)記獲得標(biāo)記抗體,是免疫電鏡樣品制備的一種方法,用于觀察抗原抗體免疫復(fù)合物方面研究的手段。
抗體結(jié)構(gòu):
  抗體是具有4條多肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu),其中2條較長(zhǎng)、相對(duì)分子量較大的相同的重鏈(H鏈);2條較短、相對(duì)分子量較小的相同的輕鏈(L鏈)。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,重鏈有μ、δ、γ、ε和α五種。 整個(gè)抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列??勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈,這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面,zui多由17個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成,少則只有2 ~ 3個(gè)。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性。一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的,位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段(crystalline fragment,FC),糖結(jié)合在FC
zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種(γ)球蛋白。后來(lái)發(fā)現(xiàn),抗體并不都在γ區(qū);并且位于γ區(qū)的球蛋白,也不一定都具有抗體活性。
   1964年,世界衛(wèi)生組織舉行專門會(huì)議,將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(Ig),如骨髓瘤蛋白,巨球蛋白血癥、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學(xué)的概念,而抗體是生物學(xué)功能的概念??梢哉f(shuō),幾乎所有抗體都是免疫球蛋白(極少數(shù)抗體為RNA),但并非所有免疫球蛋白都是抗體。<單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),叫做抗原決定簇。一個(gè)抗原上可以有好幾個(gè)不同的抗原決定簇,因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,zui終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞。只針對(duì)一個(gè)抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個(gè)純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就象導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一個(gè)抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。<


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