產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
作為流式*的突破,默克密理博旗下Amnis公司推出的FlowSight顯微成像流式細(xì)胞儀終于讓流式細(xì)胞儀睜開了“眼睛”。它不僅能夠獲得大量細(xì)胞的群體分析數(shù)據(jù),而且還能夠?qū)崟r(shí)看到細(xì)胞圖像,讓每一步的分析結(jié)果都可以通過圖像進(jìn)行確認(rèn)。因此,它被生物通廣大讀者評(píng)為“2011生命科學(xué)創(chuàng)新產(chǎn)品”之一。
FlowSight是下一代專家級(jí)流式細(xì)胞儀
FlowSight是一款體積小巧,但是功能強(qiáng)大的下一代專家級(jí)流式細(xì)胞儀。該系統(tǒng)革命性地設(shè)計(jì)提高了信噪比以及熒光檢測(cè)的靈敏度。標(biāo)配12個(gè)檢測(cè)通道,除了傳統(tǒng)熒光強(qiáng)度信息,還能獲得“每個(gè)細(xì)胞”的明場(chǎng)、暗場(chǎng)以及10個(gè)熒光圖像。FlowSight可以多配置四根激光管(405, 488, 561, 642 nm),并加配785nm激光器于SSC信號(hào)檢測(cè),同時(shí)還可配置96孔板自動(dòng)上樣系統(tǒng)(AutoSampler)。
的熒光靈敏度
FlowSight具有低于10MESF的超高檢測(cè)靈敏度,特別對(duì)于弱信號(hào)的檢測(cè),有明顯的優(yōu)勢(shì)。下圖直方圖數(shù)據(jù)表明FlowSight能清楚分辨出Spherotech 8-peak calibration bead在FITC到Cy7通道上所有不同熒光強(qiáng)度微珠的熒光強(qiáng)度峰值。即使用小于5%的熒光強(qiáng)度激發(fā),F(xiàn)ITC和PE通道也具有杰出的熒光強(qiáng)度分辨能力。而紅色(PE-Cy5)和遠(yuǎn)紅外(PE-Cy7)通道對(duì)熒光峰值的分辨能力更是超過目前特好的流式細(xì)胞儀。
白細(xì)胞五類分群
FlowSight在混合細(xì)胞樣品分群方面具有的表現(xiàn)。右圖中應(yīng)用CD45和SSC作圖,可以清楚地把人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)區(qū)分成5個(gè)細(xì)胞群。
的785nm散射光激光激光器可以清晰的將嗜酸性粒細(xì)胞和噬中性粒細(xì)胞區(qū)分開。
八色免疫熒光
FlowSight是將流式細(xì)胞儀和12通道圖像檢測(cè)結(jié)合起來的儀器。多檢測(cè)通道的搭配,更多的激光器選擇以及自動(dòng)熒光補(bǔ)償功能,使復(fù)雜的細(xì)胞分群變得更加簡(jiǎn)單。
細(xì)胞周期細(xì)化分析
細(xì)胞周期分為間期(G1、S和G2)和有絲分裂期(細(xì)胞分裂階段,M)。M期又分為前、中、后、末期。細(xì)胞周期分析是流式細(xì)胞術(shù)常見的應(yīng)用之一。FlowSight只要利用DAPI染料標(biāo)記核酸,根據(jù)DNA的凝集情況就可以利用細(xì)胞圖像對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)行精確分析;同時(shí)突破傳統(tǒng)流式的應(yīng)用限制,進(jìn)一步將M期分為四期。
細(xì)胞壞死和凋亡的區(qū)分
傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀利用膜滲透性染料識(shí)別已經(jīng)死亡和發(fā)生凋亡而失去膜完整性的細(xì)胞。但是,很難確定細(xì)胞死亡是通過凋亡的途徑還是壞死。而FlowSight通過分析每個(gè)細(xì)胞核差異,可以解決這個(gè)問題如下圖所示PI標(biāo)記的THP-1細(xì)胞,壞死的細(xì)胞維持完整的細(xì)胞核狀態(tài)而凋亡的細(xì)胞則出現(xiàn)皺縮和破碎現(xiàn)象。
圖形量化分析應(yīng)用
核轉(zhuǎn)移的細(xì)胞信號(hào)檢測(cè)
圖形量化分析功能升級(jí)后包含核轉(zhuǎn)位程度的檢測(cè)向?qū)?,可以識(shí)別任意標(biāo)記的信號(hào)分子在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核之間的轉(zhuǎn)位過程。右圖的例子展示了轉(zhuǎn)錄因子NF-κB(綠色)從細(xì)胞質(zhì)到細(xì)胞核(橘紅色)轉(zhuǎn)位的過程。對(duì)照細(xì)胞(左列)NF-κB主要定位在細(xì)胞質(zhì),核轉(zhuǎn)位數(shù)值為陰性。激活的細(xì)胞(右列)NF-κB主要定位在細(xì)胞核,核轉(zhuǎn)位數(shù)值為陽性。
細(xì)胞自噬
細(xì)胞發(fā)生自噬時(shí),作為標(biāo)記物的細(xì)胞質(zhì)LC3蛋白經(jīng)過加工在自噬小體膜上大量聚集。利用IDEAS軟件中的形態(tài)學(xué)參數(shù)——Bright Detail Itensity,能夠定量的衡量LC3-RFP熒光聚集的程度,從而對(duì)細(xì)胞狀態(tài)進(jìn)行量化分析。如圖所示是饑餓引起的細(xì)胞自噬現(xiàn)象。正常細(xì)胞的自噬程度較低、LC3-RFP聚集程度低(左圖),當(dāng)收到外界因素,比如饑餓(右圖)、生理壓力、藥物或者感染等刺激時(shí),自噬程度會(huì)顯著提高、自噬小體產(chǎn)生,導(dǎo)致LC3-RFP聚集程度上升(右圖)。
圖形量化分析功能
量化的圖像分析加速您的科學(xué)發(fā)現(xiàn)
圖像量化分析功能(QI)升級(jí)包括光學(xué)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)的強(qiáng)化,大大提高了FlowSight圖像獲取和分析能力。同時(shí)QI也整合了功能強(qiáng)大而且直觀的圖像處理包,內(nèi)含超過百種量化分析參數(shù)和多種基于圖像分析應(yīng)用的優(yōu)化分析向?qū)?,?yīng)用于核轉(zhuǎn)位、形變、內(nèi)吞、細(xì)胞凋亡等分析。