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細胞信息表
細胞名稱 U266人骨髓瘤細胞
種屬 人
組織來源 外周血
生長狀態(tài) 懸浮細胞
培養(yǎng)條件 培養(yǎng)基類型:RPMI1640培養(yǎng)基
FBS:10%
抗生素:雙抗
培養(yǎng)條件:37℃,CO2:5%
傳代方法 收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài):
如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮
培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
貼壁細胞傳代方法:
1棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。
2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸
后放入37℃培養(yǎng)箱內,隨時觀察細胞狀態(tài)變化,待細胞大部分變
圓后加*培養(yǎng)基終止消化。
懸浮細胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。
1直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,
吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)
培養(yǎng)。
2離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉移到離心管內,1000rpm,
5分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內,吹打細胞形成細胞
懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。
凍存方法 70%*培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
儲存:液氮中長期保存。
注 1觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。
2在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落,可
離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。
3收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等,請在一周內與我們
。
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