可見(jiàn)分光光度法

植物總酚（TP）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 貨號(hào)：YJS2309

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品內(nèi)容：

提取液：60%乙醇， 自備。

試劑一：液體 20mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 25mL×1 瓶，4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，4℃保存。1mg/mL 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

產(chǎn)品說(shuō)明：

植物酚類(lèi)物質(zhì)具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而 廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。

在堿性條件下，酚類(lèi)物質(zhì)將鎢鉬酸還原，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，在 760nm 處有特征吸收峰，測(cè) 760nm 處的吸光值，即可得樣品總酚含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比 色皿、蒸餾水。

操作步驟：

一、總酚提取

將樣本烘干至恒重，粉碎，過(guò) 40 目篩之后，稱(chēng)取約 0. 1g ，加入 2.5mL 提取液，用超聲提取法進(jìn) 行提取，超聲功率 300W ，破碎 5s ，間歇 8s ，60℃ , 提取 30min 。12000rpm ，25℃ , 離心 10min ， 取上清，用提取液定容至 2.5mL ，待測(cè)。

二、標(biāo)準(zhǔn)品制備：

將 1mg/mL 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液二倍稀釋至 0.3125、0.1562、0.0781、0.0391、0.0195、0.0098、0.0049、 0.0024 、0.0012 、0.0006mg/mL ，待測(cè)。

三、測(cè)定操作表

1 、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 760nm ，蒸餾水調(diào)零。

2 、操作表

空白管只測(cè)一次。

四、總酚含量計(jì)算

1 、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：

以不同濃度的單寧酸為 x 軸，ΔA（A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白）為 y  軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) y= kx+b。

2 、植物總酚含量計(jì)算：

將ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，求 x(mg/mL)。

（1） 按樣本鮮重計(jì)算

總酚含量（mg/g  鮮重）= x×V 提取÷W= 2.5x÷W （2） 按樣本

蛋白濃度計(jì)算

總酚含量（mg/mg prot）= x×V 提取÷（V 提取×Cpr）= x ÷Cpr

V 提?。禾崛∫后w積，2.5 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g。

注意事項(xiàng)：

（1）OD 值大于 1.0 ，樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定，注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。

（2）試劑一對(duì)皮膚有一定的刺激性，請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用！請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測(cè)等用途！

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