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小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)以及質(zhì)量的平衡

閱讀:118          發(fā)布時(shí)間:2016-10-10

小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)以及質(zhì)量的平衡一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過(guò)程迅速完成。在小鼠ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA檢測(cè)試劑盒中似不恰當(dāng)。
屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA檢測(cè)試劑盒反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。
phospho-p53BP1     磷酸化p53結(jié)合蛋白1抗體
PP1A    蛋白磷酸酶2Cα抗體
Phospho-Paxillin    磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
PGP9.5    神經(jīng)細(xì)胞胞漿蛋白9.5抗體
phospho-PKA beta    磷酸化蛋白激酶Aβ抗體
PKA R2    蛋白激酶A受體2α亞基抗體
phospho-PKA R2     磷酸化蛋白激酶A受體2α亞基抗體
PKA gamma    蛋白激酶Aγ抗體
PKA regulatory subunit I beta    蛋白激酶受體相關(guān)1β抗體
PRDM1    B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體
phospho-PTPRA    磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗體
PRKAR1    蛋白激酶A調(diào)節(jié)亞基a1抗體
phospho-PTPRA     磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗體
PDZD    PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK蛋白抗體
PPAP2A    磷酸脂磷酸水解酶1抗體
P14ARF    抑癌基因p16/p14/P19抗體
PTPH1    蛋白酪氨酸磷酸酶H1抗體
小鼠ELISA試劑盒

 

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