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人ELISA試劑盒試驗原理
閱讀：137 發(fā)布時間：2016-12-2人ELISA試劑盒人色素上皮衍生因子ELISA試劑盒本試劑僅供研究使用
標本：血清或血漿
試驗原理：
PEDF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知PEDF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將PEDF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PEDF的濃度呈比例關系。
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。
人ELISA試劑盒人色素上皮衍生因子ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的PEDF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的PEDF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-800ng/ml
4、敏感度： 1.0 ng/ml
碳酸二丙酯 英文名(EN)： Dipropyl carbonate,99% CAS No.： 623-96-1 規(guī)格(SP)： 1G 類別(Key)： 通用試劑
丙二酸二異丙酯 英文名(EN)： Diisopropyl malonate,99% CAS No.： 13195-64-7 規(guī)格(SP)： 25ML 類別(Key)： 通用試劑
氰乙酸甲酯 英文名(EN)： Methyl cyanoacetate,99% CAS No.： 105-34-0 規(guī)格(SP)： 100G 類別(Key)： 通用試劑
肉桂酸芐酯 英文名(EN)： Benzyl cinnamate,≥98% CAS No.： 103-41-3 規(guī)格(SP)： 100G 類別(Key)： 通用試劑
乙酸異辛酯 英文名(EN)： 2-Ethylhexyl acetate,≥99% CAS No.： 103-09-3 規(guī)格(SP)： 500ML 類別(Key)： 通用試劑
對苯二甲酸二辛酯 英文名(EN)： Dioctyl terephthalate,≥96% CAS No.： 6422-86-2 規(guī)格(SP)： 500ML 類別(Key)： 通用試劑
2-氯丙酸甲酯 英文名(EN)： Methyl 2-chloropropionate,97% CAS No.： 17639-93-9 規(guī)格(SP)： 25G 類別(Key)： 通用試劑
對羥基苯乙酸甲酯 英文名(EN)： Methyl 4-Hydroxyphenylacetate,99% CAS No.： 14199-15-6 規(guī)格(SP)： 25G 類別(Key)： 通用試劑
乙酸芳樟酯 英文名(EN)： Linalyl Acetate,≥97% CAS No.： 115-95-7 規(guī)格(SP)： 25G 類別(Key)： 通用試劑
人ELISA試劑盒