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ELISA試劑盒回收純化目的DNA片段的應用原理
閱讀:1805 發(fā)布時間:2016-12-14小鼠ELISA試劑盒實驗目的是從瓊脂糖凝膠中回收純化目的DNA 片段的方法。
回收純化目的DNA 片段實驗步驟
1. 瓊脂糖凝膠電泳制作1%瓊脂糖凝膠,對目的DNA 進行瓊脂糖凝膠電泳。
2. 切膠在紫外燈下切出含有目的DNA 片段的瓊脂糖凝膠。
3. 將切下的含有DNA 條帶的膠塊,置于1.5 ml Eppendorf 管中。
4. 加入600μl NaI 溶液,55℃溫浴10 min。
5. 加入20 μl 硅膠樹脂,混勻后室溫靜置20 min。
6. 10000 rpm 離心1 min,棄上清。
7. 加入500 μl 洗凈用緩沖液,振蕩混勻后10000 rpm 離心1 min,棄掉上清。此過程重復一次。
8. 加入30 μl TE 緩沖液,55℃溫浴5 min。
9. 10000 rpm 離心1 min,回收上清-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
小鼠ELISA試劑盒回收純化目的DNA 片段注意事項
1. 切膠時不要將DNA 長時間暴露于紫外燈下,以防止DNA 損傷;同時應防止外源DNA 的污染。
2. 盡量除去不含目的DNA 的多余膠塊,可以提高回收效率。
3. 硅膠樹脂使用前要混勻。
4. 在步驟6 中,先保留上清,待回收過程結束后若經過檢測回收效率高后可把上清棄掉,否則應保留上清,并再次加入硅膠樹脂重新回收。
5. 長鏈DNA 的回收效率較高,短鏈DNA(500bp 以下)的回收效率稍有降低。
6. 洗脫DNA 時,TE 緩沖液或超純水的用量視用戶對濃度的要求而定。
5-羧基噻吩-2-硼酸 CAS號: 465515-31-5 現貨直銷
5-溴-1-甲基-1H-吲唑 CAS號: 465529-57-1 進口、分裝
2,6-二羥基-4-甲基吡啶 CAS號: 4664-16-8 進口、組裝
4-溴-2-氯三氟甲苯 CAS號: 467435-07-0 *
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小鼠ELISA試劑盒