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技術(shù)文章

人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

閱讀:543          發(fā)布時(shí)間:2017-3-6

人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl;在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。輕輕晃動(dòng)混勻,37℃溫育60分鐘。
2. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次,拍干。
3.人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
4.取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
5.人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下測(cè)量各孔的吸光度值(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
6.人ELISA試劑盒根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的,其實(shí)際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。
19056-41-8    3-溴-4-甲氧基苯胺    
191014-55-8    4-氟-2-甲氧基苯腈    
191605-10-4    D-(+)-二對(duì)甲氧基苯甲酰酒石酸    
1916-07-0    3,4,5-*氧基苯甲酸甲酯    
19179-31-8    3,5-二甲氧基苯腈    
1918-00-9    麥草畏    
1918-77-0    2-噻吩乙酸    
19235-89-3    4-氯-2-氰基吡啶    
1923-70-2    四丁基高氯酸銨    
192725-17-0    洛匹那韋    
193353-34-3    2,5-二氟苯硼酸    
1941-24-8    硝酸四甲基銨    
19437-26-4    2-二吡啶基酮    
19444-84-9    2-羥基-丁酸酮    
1945-84-2    2-乙炔基吡啶    
1947-00-8    N-芐氧羰基--6-氨基己酸    
19493-44-8    1-氯異喹啉    
19499-60-6    N-甲基-4-硝基芐胺    
19499-61-7    N-甲基-3-硝基芐胺  
人ELISA試劑盒  

 

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