技術(shù)文章
人ELISA試劑盒驟進(jìn)行操作
閱讀:419 發(fā)布時(shí)間:2017-7-24人ELISA試劑盒驟進(jìn)行操作:
可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品。對(duì)于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白,例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等,可以參考相關(guān)文獻(xiàn)提取這些亞細(xì)胞組份蛋白,也可以使用試劑盒進(jìn)行抽提。
收集完蛋白樣品后,為確保每個(gè)蛋白樣品的上樣量一致,需要測(cè)定每個(gè)蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同,需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y(cè)定方法。因?yàn)椴煌牡鞍诐舛葴y(cè)定方法對(duì)于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。
(1)、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻(xiàn)資料進(jìn)行配制,也可以使用博研生物的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。
(2)、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積,在相同體積的上樣孔內(nèi)可以上樣更多的蛋白樣品。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關(guān)文獻(xiàn)資料配制,也可以使用我公司的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘,以充分變性蛋白。
(3)、上樣與電泳
冷卻到室溫后,把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內(nèi)即可。為了便于觀察電泳效果和轉(zhuǎn)膜效果,以及判斷蛋白分子量大小,使用預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。
電泳時(shí)通常推薦在上層膠時(shí)使用低電壓恒壓電泳,而在溴酚藍(lán)進(jìn)入下層膠時(shí)使用高電壓恒壓電泳。對(duì)于Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)電泳裝置或類似電泳裝置,低電壓可以設(shè)置在80-100V,高電壓可以設(shè)置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見,也可以采用整個(gè)SDS-PAGE過(guò)程恒壓的方式,通常把電壓設(shè)置在100V,然后設(shè)定定時(shí)時(shí)間為90-120分鐘。設(shè)置定時(shí)可以避免經(jīng)常發(fā)生的電泳過(guò)頭。
通常電泳時(shí)溴酚藍(lán)到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳,或者可以根據(jù)預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)的電泳情況,預(yù)計(jì)目的蛋白已經(jīng)被適當(dāng)分離后即可停止電泳。
人ELISA試劑盒豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 CTLA-4/CD152(Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4) ELISA Kit 人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4
豬可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Lambda -IgLC(Human lambda immunoglobulin light chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白輕鏈lambda
豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 pMHC(Human peptide major histocompatibility complex) ELISA Kit 人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物
豬去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 CLA(Human cutaneous lymphocyte-associated antigen) ELISA Kit 人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原
豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 T-TM(Human thrombinthrombomodulin compound) ELISA Kit 人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物
豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Hc(Human Hemolytic complement) ELISA Kit 人溶血補(bǔ)體
豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 TCR(Human T cell receptor) ELISA Kit 人T細(xì)胞受體
豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 LAC/LA(Human lupus anticoagulant) ELISA Kit 人狼瘡抗凝抗體
豬一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human sreum albumin,HSA ELISA Kit 人血清白蛋白
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit 人2,3Dinor血栓烷B2
豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit 人11去氫血栓烷B2
豬血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓調(diào)節(jié)蛋白
豬血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit 人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物
豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human plaet membrane glycoprotein II b III a,GP- II b III a ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa
豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 人血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1
豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 人血漿α顆粒膜蛋白
豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9
豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Complement 4,C4 ELISA Kit 人補(bǔ)體蛋白4
豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Complement 3,C3 ELISA Kit 人補(bǔ)體蛋白3
豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human coagulation factor II ,F II ELISA Kit 人凝血因子Ⅱ
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原B27
豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Haptoglobin,Hpt/HP ELISA KIT 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白
豬白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 人血清總補(bǔ)體
豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit 人過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4
豬生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Complement fragment ,C ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷
豬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷3a
豬磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原
豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human coagulation factor IX ,F IX ELISA Kit 人凝血因子Ⅸ
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human coagulation factor X ,F X ELISA Kit 人凝血因子Ⅹ
豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子
豬雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物
豬補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit 人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物
豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit 人抗凝血酶受體
豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human thrombin receptor,TR ELISA Kit 人凝血酶受體
豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Factor VIII -related Antigen,F VIII Ag ELISA Kit 人第八因子相關(guān)抗原
豬促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 人血纖蛋白原人ELISA試劑盒