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技術(shù)文章

小鼠ELISA試劑盒操作步驟如下

閱讀:378          發(fā)布時(shí)間:2017-11-3

小鼠ELISA試劑盒操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2) 加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。 洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3) 加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合 的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。 在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測(cè)。
在一步法測(cè)定中,當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí),過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同(參見1.3.2,圖1-4),如按常法測(cè)讀,所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量,這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí),反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時(shí),應(yīng)注意可測(cè)范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
小鼠ELISA試劑盒人熱休克蛋白22(HSP-22)免疫試劑盒    Human Heat Shock Protein 22(HSP-22)ELISA Kit
人熱穩(wěn)定抗原(HSA/CD24)免疫試劑盒    Human heat stable antigen,HSA/CD24 ELISA Kit
人缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒    Human Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit
人犬尿氨酸(KYN)免疫試劑盒    Human Kynurenine,KYN ELISA Kit
人醛脫氫酶7家族,成員A1(ALDH7A1)免疫試劑盒    Human Alpha-aminoadipic semialdehyde dehydrogenase,ALDH7A1 ELISA kit
人醛糖還原酶(AR)免疫試劑盒    Human Aldose Reductase,AR ELISA Kit
人醛縮酶(ALD)免疫試劑盒    Human Aldolase,ALD ELISA Kit
人醛固酮(ALD)免疫試劑盒    human aldosterone,ALD ELISA Kit
人去乙酰化酶Sirtuin-7(SIRT7/SIR2L7)免疫試劑盒    Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-7,SIRT7/SIR2L7 ELISA kit
人去乙?;窼irtuin-6(SIRT6/SIR2L6)免疫試劑盒    Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-6,SIRT6/SIR2L6 ELISA kit
人去乙酰化酶Sirtuin-5(SIRT5/SIR2L5)免疫試劑盒    Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-5,SIRT5/SIR2L5 ELISA kit
人去乙?;窼irtuin-4(SIRT4/SIR2L4)免疫試劑盒    Human NAD-dependent ADP-ribosyltransferase sirtuin-4,SIRT4/SIR2L4 ELISA kit
人去乙?;窼irtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)免疫試劑盒    Human SIRT2/SIR2L/SIR2L2 ELISA Kit
人去乙?;窼irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)免疫試劑盒    Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-1,SIRT1/SIR2L1 ELISA kit
人去乙?;囸I激素(dGHRL)免疫試劑盒    Human deacylated appetite-regulating hormone,dGHRL ELISA kit
人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)抗體免疫試劑盒    Human asialoglyco protein receptor(ASGPR)antibody ELISA Kit
人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)免疫試劑盒    Human asialoglyco protein receptor,ASGPR ELISA Kit
人去甲腎上腺素(NA)免疫試劑盒    human Noradrenaline,NA ELISA Kit
人趨化因子受體3(CCR3)免疫試劑盒    Human CCR3 ELISA Kit
人趨化因子配體17(CXCL17)免疫試劑盒    Human chemokine (C-X-C motif) ligand 17 (CXCL17) ELISA kit
人趨化因子26(CCL26)免疫試劑盒    Human C-C motif chemokine 26,CCL26 ELISA kit
人趨化因子2(CXCL2)免疫試劑盒    Human C-X-C motif chemokine 2,CXCL2 ELISA kit
人趨化因子(FK)免疫試劑盒    Human Fractalkine,FK ELISA Kit
人驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員27(KIF27)免疫試劑盒    Human KIF27 ELISA Kit
人清道夫受體類B成員1(SCARB1)免疫試劑盒    Human SCARB1 ELISA Kit
人輕鏈鐵蛋白(L-ferritin)免疫試劑盒    Human L-ferritin ELISA Kit
人(HYD)免疫試劑盒    Human Hydrocortisone,HYD ELISA Kit
人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)免疫試劑盒    human HFE2 LISA Kit
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