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人ELISA試劑盒雙抗原夾心法測抗體
閱讀:805 發(fā)布時間:2018-3-23人ELISA試劑盒雙抗原夾心法測抗體
反響辦法與雙抗體夾心法相似。
用特異性抗原進行包被和制備酶聯(lián)絡物,以檢查相應的抗體。與直接法測抗體的不一樣的地方為以酶標抗原替代酶標抗抗體。
此法中受檢標本不需稀釋,可直接用于測定,因而其敏感度相對高于直接法。
乙肝標志物中抗HBs的檢查常選用本法。
本法關鍵在于酶標抗原的制備,應根據(jù)抗原構造的不一樣,尋找合適的符號辦法。
只需獲得對于受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶聯(lián)絡物而樹立此法。
如抗體的來歷為抗血清,包被和酶標用的抗體別離取自不一樣種屬的動物。
如運用單克隆抗體,通常挑選兩個對于抗原上不一樣決定簇的單抗,別離用于包被固相載體和制備酶聯(lián)絡物。
這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且能夠將受檢標本和酶標抗體一同保溫反響,作一步檢查。
在一步法測定中,當標本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原別離和固相抗體及酶標抗體聯(lián)絡,而不再構成"夾心復合物"。
用作雙抗體夾心法檢查的血清標本中如富含RF,它可充任抗原成份,一同與固相抗體和酶標抗體聯(lián)絡,表現(xiàn)出假陽性反響。
選用F(ab')或Fab片段作酶聯(lián)絡物的試劑,因為去除了Fc段,然后消除RF的煩擾。
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