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撫生試劑-免疫酶測定法(ELISA)
閱讀:112 發(fā)布時間:2014-4-8免疫酶測定法(ELISA)
【摘要】:(一)ELISA實驗原理及類型 將已知抗體或抗原結(jié)合在某種固相載體上,并保持其免疫活性。測定時將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體或酶標(biāo)抗原按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng),用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離物成分,然后加入底物顯色,進(jìn)行定性或定量測定。 ELISA可用于檢測抗體,也可用于檢測抗原。根據(jù)檢測目的和操作步驟的不同,通常有三種類型的檢
相關(guān)專題 ELISA免疫實驗技術(shù) (一)elisa實驗原理及類型
將已知抗體或抗原結(jié)合在某種固相載體上,并保持其免疫活性。測定時將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體或酶標(biāo)抗原按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng),用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離物成分,然后加入底物顯色,進(jìn)行定性或定量測定。
ELISA可用于檢測抗體,也可用于檢測抗原。根據(jù)檢測目的和操作步驟的不同,通常有三種類型的檢測方法。
1.間接法 此法是檢測抗體zui常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體上,加入待測血清(抗體)與之結(jié)合,洗滌后,加酶標(biāo)抗體和底物進(jìn)行測定。
2.雙抗體夾心法 此法常用于檢測抗原。將已知抗體吸附于固相載體,加入待測標(biāo)本(含相應(yīng)抗原)與之結(jié)合,溫育后洗滌,加入酶標(biāo)抗體及底物溶液進(jìn)行測定。
3.競爭法 此法可用于抗原及半抗原的定量測定,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,將特異性抗體吸附于固相載體上,加入待測抗原和一定量的已知酶標(biāo)抗原,使二者競爭地與固相抗體結(jié)合,經(jīng)過洗滌分離,zui后結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原與待測抗原含量呈負(fù)相關(guān)。