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技術(shù)文章

ELISA(雙抗體夾心法)檢測(cè)HBsAg

閱讀:643          發(fā)布時(shí)間:2015-6-5

方法
1、ELISA試劑盒加入待測(cè)標(biāo)本每孔0.05ml,并設(shè)HBsAg陽(yáng)性對(duì)照2孔,HBsAg陰性對(duì)照2孔,空白對(duì)照1孔,然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對(duì)照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復(fù)五次后拍干。
3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。
結(jié)果
ELISA試劑盒比色法:波長(zhǎng)450nm,先用空白孔校零點(diǎn),然后讀取各孔光密度值。
樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值≥ 2.1判斷為陽(yáng)性,否則為陰性。
備注:陰性對(duì)照平均OD值低于0.05作0.05計(jì)算,高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。陽(yáng)性對(duì)照OD值≥0.8,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。
注意事項(xiàng)
1、ELISA試劑盒置2℃~8℃保存。
2、使用前試劑應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加。
3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測(cè)標(biāo)本所需微孔條,置室溫平衡30分鐘后再行測(cè)試,余者應(yīng)及時(shí)封存于冰箱中以備后用。
4、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐。
5、不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿通用。
6、結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。
7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時(shí),請(qǐng)置37℃至溶解。
ADAMTS7    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體
beta Adducin    內(nèi)收蛋白抗體
ADFP    脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體
Adiponectin Receptor 1    脂聯(lián)素受體1抗體
ADM R    腎上腺髓質(zhì)素受體抗體
Adiponectin    脂聯(lián)素抗體
ADM    腎上腺髓質(zhì)素抗體
Adenosine A3 Receptor    腺苷受體A3抗體
ADRA2    ADRA2腎上腺素能受體2抗體
ADRB1    腎上腺素能受體β1抗體
ADRB2    腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體
AGEs    晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體
Aggrecan1    軟骨蛋白聚糖抗體
ALAS-E    5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
ASPP1    p53凋亡刺激蛋白1抗體
ASPP2    P53凋亡刺激蛋白2抗體
ARIP2B    激活素受體2B抗體
AIMP2    AIMP2抗體
ACHE    乙酰膽堿酶抗體
ALAS1    5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
alpha Defensin 1    防御素α1/3抗體

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