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ELISA試劑盒質(zhì)量保證是一個復雜的過程，許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量
一、方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法（HBeAb,HBcAb等采用）因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響，結(jié)果重復性較差，質(zhì)量較難控制。

 

二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復雜過程，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復凍融造成試劑的失效。

三、樣本因素
標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。

四、操作因素對ELISA結(jié)果的影響
ELISA試劑操作步驟復雜，操作不當將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色

 

五、灰區(qū)的設置
通常情況下，ELISA定性實驗以“陽性"和“陰性"來報告結(jié)果，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"（cut-off value，CO值），這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù)。

 六、標本復查
ELISA試劑手工檢測過程復雜，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異，因此加大復查力度是保證結(jié)果準確性的可靠方法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結(jié)果進行復查。

 七、結(jié)果判斷和報告
常用下列幾種方法表示結(jié)果：
1.定性測定
2.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示。
3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定，繪制標準曲線，結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線