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褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書
閱讀:162 發(fā)布時間:2015-1-28提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 86KB |
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褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標本:體液
褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。
褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書操作注意事項
1.試劑應(yīng)按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。
褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測值范圍:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
HAase 人透明質(zhì)酸酶 規(guī)格: 48T/96T
HABP 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T/96T
HA 人透明質(zhì)酸 規(guī)格: 48T/96T
CP/CER 人銅藍蛋白 規(guī)格: 48T/96T
HOXB2 人同源框B2 規(guī)格: 48T/96T
GTC 人通用轉(zhuǎn)錄復合體 規(guī)格: 48T/96T
FE 人鐵蛋白 規(guī)格: 48T/96T
AZU 人天青殺素 規(guī)格: 48T/96T
GOT/GPT 人天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶 規(guī)格: 48T/96T
AST 人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格: 48T/96T
SMAF 人特異性巨噬細胞武裝因子 規(guī)格: 48T/96T
iNV 人套膜蛋白 規(guī)格: 48T/96T
iNV 人套膜蛋白 規(guī)格: 48T/96T
GP-MM 人糖原磷酸化酶同工酶MM 規(guī)格: 48T/96T
GP-II 人糖原磷酸化酶同工酶II 規(guī)格: 48T/96T
GP-BB 人糖原磷酸化酶同工酶BB 規(guī)格: 48T/96T
GSK 人糖原合成酶激酶 規(guī)格: 48T/96T
CDT 人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白 規(guī)格: 48T/96T
GR 人糖皮質(zhì)類固醇受體 規(guī)格: 48T/96T
GPI 人糖磷脂酰肌醇 規(guī)格: 48T/96T
CA19-9 人糖鏈抗原19-9 規(guī)格: 48T/96T
GlyCAM-1 人糖基化依賴的細胞黏附分子 規(guī)格: 48T/96T
GHbA1c 人糖化血紅蛋白A1c 規(guī)格: 48T/96T
GSP 人糖化蛋白 規(guī)格: 48T/96T
GA 人糖化白蛋白 規(guī)格: 48T/96T
gp130 人糖蛋白130 規(guī)格: 48T/96T
CA-2 人碳酸酐酶2 規(guī)格: 48T/96T
CA 人碳酸酐酶 規(guī)格: 48T/96T
親環(huán)蛋白 人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶 規(guī)格: 48T/96T
PG 人肽聚糖 規(guī)格: 48T/96T
PPI 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶 規(guī)格: 48T/96T
pMHC 人肽-MHC復合物 規(guī)格: 48T/96T
PLGF 人胎盤生長因子 規(guī)格: 48T/96T
PL 人胎盤泌乳素 規(guī)格: 48T/96T
PLAP 人胎盤堿性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
HPRI 人胎盤核糖核酸抑止劑 規(guī)格: 48T/96T
PP 人胎盤蛋白 規(guī)格: 48T/96T
HPL 人胎盤催乳素 規(guī)格: 48T/96T
HBF 人胎兒血紅蛋白 規(guī)格: 48T/96T
FK506 人他克莫司 規(guī)格: 48T/96T
TREM-1 人髓系細胞觸發(fā)受體-1 規(guī)格: 48T/96T
MBP 人髓鞘堿性蛋白抗體 規(guī)格: 48T/96T
MBP 人髓磷脂堿性蛋白 規(guī)格: 48T/96T
人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG 規(guī)格: 48T/96T
MPO 人髓過氧化物酶 規(guī)格: 48T/96T
ASM 人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶 規(guī)格: 48T/96T
ACP 人酸性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
aFGF-1 人酸性成纖維細胞生長因子1 規(guī)格: 48T/96T
RLN 人松弛肽/松弛素 規(guī)格: 48T/96T
FHA 人絲狀血球凝集素 規(guī)格: 48T/96T
MAPK 人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶 規(guī)格: 48T/96T
PRSS 人絲氨酸蛋白酶 規(guī)格: 48T/96T
STK 人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
Hirudin 人水蛭素 規(guī)格: 48T/96T