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氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書
閱讀:136 發(fā)布時間:2015-2-6提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 68.5KB |
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氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本:體液
氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。
氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書操作注意事項
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測值范圍:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
ATR 大鼠抗凝血酶受體 規(guī)格: 48T/96T
AT-Ⅲ 大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體 規(guī)格: 48T/96T
AECA 大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體 規(guī)格: 48T/96T
TRACP-5b 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b 規(guī)格: 48T/96T
AsAb 大鼠抗精子抗體 規(guī)格: 48T/96T
ATGA/TGAB 大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體 規(guī)格: 48T/96T
TPO-Ab 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 規(guī)格: 48T/96T
TPO-Ab 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 規(guī)格: 48T/96T
EMA IgA 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA 規(guī)格: 48T/96T
gp210 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體 規(guī)格: 48T/96T
AMA 大鼠抗單核細(xì)胞抗體 規(guī)格: 48T/96T
TRAb 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體 規(guī)格: 48T/96T
αFodrin IgG/IgA 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA 規(guī)格: 48T/96T
大鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit,48T/96T 大鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
大鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit,48T/96T 大鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
MIF 大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子 規(guī)格: 48T/96T
MIP-5 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1β/CCL4 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α 規(guī)格: 48T/96T
MIP-3β 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β 規(guī)格: 48T/96T
MIP-3α 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α 規(guī)格: 48T/96T
MIP-2 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2 規(guī)格: 48T/96T
AmAC-1 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1 規(guī)格: 48T/96T
MDC/CCL22 大鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
M-CSF 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格: 48T/96T
MT 大鼠金屬硫蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ADAM8 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8 規(guī)格: 48T/96T
CNTF 大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
Hpt/HP 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CTGF 大鼠結(jié)締組織生長因子 規(guī)格: 48T/96T
Des 大鼠結(jié)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Cav-1 大鼠窖蛋白Caveolin1 規(guī)格: 48T/96T
KAF 大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子 規(guī)格: 48T/96T