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小鼠β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
閱讀:74 發(fā)布時(shí)間:2016-11-14提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 254.9KB |
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小鼠β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素:
(1)小鼠β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒嚴(yán)重溶血,以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽(yáng)性;
(2)混有紅細(xì)胞的血清 易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;
(3)如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng);
(4)標(biāo)本凝固不全,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA 測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;
(5)采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染;
(6)塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深。超過(guò)一周測(cè)定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存;使用一次性玻璃試管或真空管采血管;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會(huì)增加OD 值,可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān);EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA 系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性;血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?nbsp;
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