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肌紅蛋白（Mb）ELISA檢測試劑盒標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
牛肌紅蛋白（Mb）ELISA試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
4800ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2400ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1200ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
600ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
300ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此
重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50µl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.肌紅蛋白（Mb）ELISA檢測試劑盒測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
Tricine-SDS-PAGE 配膠液        遺傳霉素    100mg
Tricine-SDS-PAGE 配膠液        葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶    1000U
Tricine-SDS-PAGE 上樣液        D- 氨基半乳糖鹽酸鹽    250mg
Tricine-SDS-PAGE 上樣液        D- 半乳糖    25g
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )        D- 半乳糖醛酸    1g
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )        明膠    50g
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )        硫酸慶大霉素    500mg
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )        赤霉素    250mg
        谷氨酸脫氫酶    3000U
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)        姬姆色素染料    1g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)        γ- 球蛋白 ( 牛血 )    1g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)        D- 氨基葡萄糖鹽酸鹽    10g
高 pH 緩沖液套裝        D- 無水葡萄糖    250g
中 pH 緩沖液套裝        葡萄糖氧化酶    10Ku
低 pH 緩沖液套裝        葡萄糖 -6- 磷酸二鈉    500mg
肌紅蛋白（Mb）ELISA檢測試劑盒