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人ELISA試劑盒實驗過程必知小知識
閱讀:73 發(fā)布時間:2018-1-8提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 13.9KB |
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人ELISA試劑盒實驗過程必知小知識:
① 建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
② 若顯色過淺,可適當延長底物溫育時。
③ 實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
④ 酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標本宜在新鮮時檢測,如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應,保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結標本溶解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。
⑧ 反復凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
樣本處理的具體方法
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人ELISA試劑盒血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit 英文名: Monkey Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA Kit 英文名: Monkey Vascular endothelial cell growth factor receptor,VEGFR-3/Flt-4 ELISA kit
血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA Kit 英文名: Monkey Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit
性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA Kit 英文名: Monkey sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA kit
脫氫表雄酮(DHEA)ELISA Kit 英文名: Monkey Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit
天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)ELISA Kit 英文名: Monkey Aspartate Aminotransferase,AST ELISA kit
瘦素(LEP)ELISA Kit 英文名: Monkey Leptin,LEP ELISA Kit
腎上腺髓質素(ADM)ELISA Kit 英文名: Monkey adrenomedullin,ADM ELISA Kit
神經型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA Kit 英文名: Monkey Neuronal Nitric Oxide Synthase,nNOS ELISA Kit
神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA Kit 英文名: Monkey glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit
凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA Kit 英文名: Rhesus thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit
腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA Kit 英文名: Monkey brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit
內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit 英文名: Monkey Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit
內皮素1(ET-1)ELISA Kit 英文名: Monkey Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit
內毒素(ET)ELISA Kit 英文名: Monkey endotoxin,ET ELISA Kit
免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit 英文名: Monkey Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
類風濕因子(RF)ELISA Kit 英文名: Monkey rheumatoid factor(RF)ELISA Kit
巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA Kit 英文名: Monkey Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α/CCL20 ELISA Kit
巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA Kit 英文名: Monkey Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA kit
膠原酶I(Collagenase I)ELISA Kit 英文名: Monkey Collagenase I ELISA Kit
甲狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit 英文名: Monkey Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit
基質金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA Kit 英文名: Monkey matrix metalloproteinase 11,MMP11 ELISA Kit
過氧化氫酶(CAT)ELISA Kit 英文名: Monkey Catalase,CAT ELISA kit
谷胱甘肽還原酶(GR)ELISA Kit 英文名: Monkey Glutathione Reductase,GR ELISA Kit
谷胱甘肽S轉移酶(GSTs)ELISA Kit 英文名: Monkey glutathione S-transferases,GSTs ELISA Kit
睪酮(T)ELISA Kit 英文名: Monkey Testosterone(T)ELISA Kit
分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA Kit 英文名: Monkey secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA Kit
單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA Kit 英文名: Monkey monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP1/MCAF ELISA kit人ELISA試劑盒