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小鼠ELISA試劑盒驗中的封閉液小知識
閱讀:111 發(fā)布時間:2018-1-10提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 13.9KB |
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小鼠ELISA試劑盒驗中的封閉液小知識
1、ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數(shù)選擇前者。
實驗操作控制:
1、嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
2、加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
3、封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
4、用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
5、合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
6、加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
7、顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
8、加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
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