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大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素分析
1、封閉與否
牛血清白蛋白在ELISA反應(yīng)中可以防止酶的分解和非特異性吸附。但是封閉并不是對(duì)所有的ELISA體系都必須。有實(shí)驗(yàn)表明，牛血清白蛋白封閉并不能提高ELISA體系的檢測(cè)靈敏度，反而影響了低濃度樣品的檢測(cè)。原因可能是高濃度下的牛血清白蛋白可能會(huì)影響低濃度的標(biāo)準(zhǔn)品/樣本與抗體結(jié)合，導(dǎo)致檢測(cè)的靈敏度降低。因此，只要抗體的活性高，也可以不用封閉這一常用的步驟。
2、洗液中吐溫濃度
吐溫20是陰離子表面活性劑，防止了抗原抗體的非特異性結(jié)合同時(shí)也防止后面的抗體或樣品吸附到微孔板上，因此ELISA包被抗體時(shí)一定不能含有吐溫20，但是包被以后的步驟中的緩沖液都可以含有吐溫20，其濃度在0.05%為*。
3、樣本和檢抗的加樣方式
雙抗夾心法ELISA常規(guī)檢測(cè)方法是樣品、抗體試劑單獨(dú)加入。但有些試劑盒推薦樣品和檢測(cè)抗體一起加來(lái)縮減步驟從而加快檢測(cè)的時(shí)間。然而由于游離的樣品和檢測(cè)抗體先結(jié)合后形成空間位阻效應(yīng)，可能會(huì)影響樣品和包被抗體的結(jié)合。所以，一般不建議將ELISA步驟中樣品和檢測(cè)抗體一同孵育。
4、孵育溫度
孵育溫度可以選擇25℃，這樣可以降低檢測(cè)的背景而又可以保持其在37℃下的檢測(cè)靈敏度。然而在OD值整體偏低的情況，就不建議這么做了。
5、邊緣效應(yīng)
邊緣效應(yīng)是在使用96孔板的ELISA測(cè)定中，外周孔顯色較中心孔深的現(xiàn)象。產(chǎn)生的原因可能是96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度造成的，因此在溫育時(shí)盡量采用水浴。
6、樣本嚴(yán)重溶血
樣本嚴(yán)重溶血紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)，釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測(cè)定試驗(yàn)中，容易在溫育過(guò)程中吸附于微孔板，從而與加入的底物反應(yīng)顯色，干擾測(cè)定結(jié)果，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。
7、樣本污染
樣本的污染菌體可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶，使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)非特異性顯色。因此，ELISA檢測(cè)應(yīng)采集新鮮樣本。
大鼠ELISA試劑盒大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)ELISA試劑盒    ，英文名：    PPAR-B/PPARD ELISA Kit    
大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒    ，英文名：    PPAR-α ELISA Kit   
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大鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒    ，英文名：    C4a ELISA Kit    
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大鼠胱抑素SA(CST2)ELISA試劑盒    ，英文名：    CST2 ELISA Kit    
大鼠胱抑素S(CST4)ELISA試劑盒    ，英文名：    CST4 ELISA Kit    
大鼠胱抑素D(CST5)ELISA試劑盒    ，英文名：    CST5 ELISA Kit    
大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒    ，英文名：    Casp-9 ELISA Kit    
大鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒    ，英文名：    Casp-8 ELISA Kit    
大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA試劑盒    ，英文名：    CASP7 ELISA Kit    
大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒    ，英文名：    Casp-3 ELISA Kit    
大鼠胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)ELISA試劑盒    ，英文名：    CSE ELISA Kit    
大鼠胱硫醚γ裂解酶(CSE)ELISA試劑盒    ，英文名：    CSE ELISA Kit    
大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)ELISA試劑盒    ，英文名：    CBS ELISA Kit    
大鼠固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1C(SREBP-1C)ELISA試劑盒    ，英文名：    SREBP-1C ELISA Kit    
大鼠固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1A(SREBP-1A)ELISA試劑盒    ，英文名：    SREBP-1A ELISA Kit    
大鼠骨織素(Ostn)ELISA試劑盒    ，英文名：    Ostn ELISA Kit    
大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒    ，英文名：    ON ELISA Kit    
大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒    ，英文名：    BMP-6 ELISA Kit    
大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒    ，英文名：    BMPs ELISA Kit    
大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒    ，英文名：    ALP-B ELISA Kit
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