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小鼠ELISA試劑盒實驗的操作要點(diǎn)

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小鼠ELISA試劑盒實驗的操作要點(diǎn)
一、標(biāo)本的采集及保存
1、血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4、樣本處理:血清或血漿標(biāo)本推薦稀釋10,000倍。
注:以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過1個月,-80℃不應(yīng)超過2個月;標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。
二、試劑的準(zhǔn)備 
按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實驗中需用的試劑. ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的.自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正.從冰箱中取出的試 驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用.試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。
三、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
四、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
五、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
六、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
七、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠ELISA試劑盒大鼠膽囊收縮素(CCK)ELISA試劑盒    ,英文名:    CCK ELISA Kit    
大鼠膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)ELISA試劑盒    ,英文名:    ChAT ELISA Kit    
大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒    ,英文名:    CETP ELISA Kit    
大鼠膽固醇24S-羥化酶(CYP46)ELISA試劑盒    ,英文名:    CYP46 ELISA Kit    
大鼠膽固醇(CH)ELISA試劑盒    ,英文名:    CH ELISA Kit    
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCP-4/CCL13 ELISA Kit    
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCP-4 ELISA Kit    
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCP-3/CCL7 ELISA Kit    
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCP-2/CCL8 ELISA Kit    
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit    
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCP-1 ELISA Kit    
大鼠單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒    ,英文名:    MAO ELISA Kit    
大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒    ,英文名:    Big ET ELISA Kit    
大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒    ,英文名:    PRL ELISA Kit    
大鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒    ,英文名:    OT ELISA Kit    
大鼠促胰液素/胰泌素(Sct)ELISA試劑盒    ,英文名:    Sct ELISA Kit    
大鼠促性腺激素抑制激素(GnIH)ELISA試劑盒    ,英文名:    GnIH ELISA Kit    
大鼠促性腺激素釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA試劑盒    ,英文名:    GNRHR-Ab ELISA Kit 
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