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ELISA試劑盒實驗時操作留意事項
閱讀:101 發(fā)布時間:2016-7-21 對于ELISA試劑盒的每一步都要留意才行。 ELISA試劑盒加樣時的防錯小經(jīng)驗 (1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比方報紙,墊在下面,這么,加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會變小,沒加的字正常,十分簡單差異。 (2)能夠利用液面反光與沒有加的孔加以差異 (3)在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也能夠加以差異 3、棋盤實驗的操作方法: (1)將抗原按必定的梯度倍比稀釋后,按照ELISA從上到下(或許從左到右)的順序包被。 (2)將抗體按必定的梯度倍比稀釋后按照ELISA試劑盒從左到右或許從上到下參加。 (3)二抗的稀釋倍數(shù)是必定的,然后顯色,讀值。 OD值的測守時,波長要依據(jù)顯色劑的不一樣而定,通常上我們都運用TMB顯色,450nm讀值。依據(jù)讀值得成果能夠選定適宜的抗原和抗體效價,這即是棋盤 實驗的意圖,假如抗原包被量已知而二抗的工作濃度不確定的話就用一抗和二抗作棋盤實驗。
留意事項
1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保留。
2.濃洗刷液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。
3.各步加樣均應(yīng)運用加樣器,并常常校正其準(zhǔn)確性,以避免實驗誤差。一次加樣時刻*控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,引薦運用排槍加樣。
4.請每次測定的一起做規(guī)范曲線,*做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測定,核算時請zui終乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性運用,ELISA試劑盒以避免穿插污染。
6.底物請避光保留。
C8orf30A 8號染色體開放閱讀框30a抗體
CYP11A1 細(xì)胞色素P450 11A1抗體
CPT1A 肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A抗體
CDC42 細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體
Phospho-CDC42 (Ser71) 磷酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體
CAP2 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體
CD15 階段特異性胚胎表面抗原-1抗體
C20orf202 20號染色體開放閱讀框202抗體
CCL28 粘膜相關(guān)上皮趨化因子28抗體