詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | CWC22蛋白抗體 |
英文名稱 | CWC22 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
Maritaleamyrionectae現(xiàn)貨,ATCC菌株
Spongiibactermarinus培養(yǎng),ATCC菌株
Phaeobacterinhibens保存,ATCC菌株
Fulvimarinapelagi售價(jià),ATCC菌株
Aurantimonascoralicida現(xiàn)貨,ATCC菌株
Psychrobacillusinsolitus培養(yǎng),ATCC菌株
羅伊氏乳桿菌保存,ATCC菌株
惰性解油螺旋菌售價(jià),ATCC菌株
不均一核核糖核蛋白K(HNRPK)ELISA Kit for Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein K (HNRPK)規(guī)格:48T/96T
整合素α1(ITGα1)ELISA Kit for Integrin Alpha 1 (ITGa1)規(guī)格:48T/96T
剪切修復(fù)交叉互補(bǔ)修復(fù)缺陷偶聯(lián)因子1(ERCC1)ELISA Kit for Excision Repair Cross Complementing Rodent Repair Deficiency Complementation 1 (ERCC1)規(guī)格:48T/96T
癌/抗原62(CTAG62)ELISA Kit for Cancer/Testis Antigen 62 (CTAG62)規(guī)格:48T/96T
尿嘧啶磷核糖轉(zhuǎn)移酶(UPRT)ELISA Kit for Uracil Phosphoribosyltransferase (UPRT)規(guī)格:48T/96T
二二醇脫酶(DHDH)ELISA Kit for Dihydrodiol Dehydrogenase (DHDH)規(guī)格:48T/96T
半胱酰白三烯受體1(CYSLTR1)ELISA Kit for Cysteinyl Leukotriene Receptor 1 (CYSLTR1)規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞程序性死亡蛋白5(PDCD5)ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 5 (PDCD5)規(guī)格:48T/96T
Tricellulin蛋白(TRIC)ELISA Kit for Tricellulin (TRIC)規(guī)格:48T/96T
唾液轉(zhuǎn)移酶7D(SIAT7D)ELISA Kit for Sialyltransferase 7D (SIAT7D)規(guī)格:48T/96T
絲/蘇激酶10(STK10)ELISA Kit for Serine/Threonine Kinase 10 (STK10)規(guī)格:48T/96T
ATP合酶6(ATP6)ELISA Kit for ATP Synthase 6 (ATP6)規(guī)格:48T/96T
CWC22蛋白抗體200mg亞歷山大染色27335-85-996T脫酶(ALDH)CLIA試劑盒HPLC≥96%流行性型腦炎抗體檢測試劑盒5mgsTie-27365-8學(xué)試劑葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白14(GLUT14)200mg亞歷山大染色9087-69-872-48-096T二化酶(DAO)CLIA試劑盒HPLC≥98%流行性腦脊髓膜炎抗體檢測試劑盒20mgsTM26239化學(xué)試劑葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(GLUT5)
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200mg尼氏染色(堇法)9051-29-078281-02-496T環(huán)腺苷(cAMP)HPLC≥98%流感B病毒抗體IgG 試劑盒20mgsTNFR141689-3化學(xué)試劑葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8(GLUT8)200mg油50-81-734540-22-296T血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)HPLC≥98%流感B病毒檢測試劑盒20mgsTNFR241689-31-運(yùn)蛋白1(NKCC1)