詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 緊密連接蛋白4抗體 |
英文名稱 | Claudin 4 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
干細(xì)胞因子受體(SCFR)植物類諾卡氏菌拉丁屬名: Nocardioides plantarum
正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5) 短密青霉拉丁屬名: Penicillium brevicompactum
神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)香菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
的神經(jīng)生長因子(NGF) 擴(kuò)散炭層菌拉丁屬名: Nemania diffusa
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)毛栓孔菌拉丁屬名: Trametes hirsuta
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)泡囊短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4) 乳酸乳球菌乳亞種拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp. lactis
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)葡萄座腔菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)大腸埃希菌拉丁屬名: coli
單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)產(chǎn)氣列契瓦尼爾氏菌拉丁屬名: Lechevalieria aerocolonigenes
單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)大腸埃希菌拉丁屬名: coli
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)芬尼青霉拉丁屬名: Penicillium fennelliae
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)云芝栓孔菌(變色栓菌)拉丁屬名: Trametes versicolor
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)枝孢屬拉丁屬名: Aspergillus flavusCladosporium sp.
粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces sp.
緊密連接蛋白4抗體神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體Orientin 2''-O-rhamside中文名:別名:2''-O-Rhamsylorientin; Luteolin 8-C-neohesperidoside分子式:C27H30O15
錨定蛋白G抗體Galuteolin中文名:木犀草素-5-O-葡萄糖苷別名:Luteolin 5-O-glucoside分子式:C21H20O11
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體2'-Prenylisorhamnetin中文名:別名:5,7,4'-Trihydroxy-2'-prenyl-3'-methoxyflavol分子式:C21H20O7
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體 (N端抗體)6'-Prenylisorhamnetin中文名:別名:5,7,4'-Trihydroxy-6'-prenyl-3'-methoxyflavol分子式:C21H20O7
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體Mikanin中文名:別名:分子式:C18H16O7