產(chǎn)品分類:指示劑
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:?jiǎn)我凰釅A指示劑
注意事項(xiàng):鄰苯二酚紫變色范圍:pH4.0-7.0,顏色由紅色變?yōu)樗{(lán)色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
鄰苯二酚紫指示劑 | 100ml | FS-R6899 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
鹽魯西 Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α4抗體包裝1g
Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α5抗體包裝25g
米帕明/咪 Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α9抗體包裝5g
鹽羅哌 Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α7抗體包裝25g
鹽羅替戈 Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α8抗體包裝5g
鹽洛貝林 Silica gel for column chromatography絲蛋白10抗體包裝1g
鹽金剛 Silicic acid hydrate原鈣粘蛋白12抗體包裝25g
鹽托咪定 Silicon monoxide前列腺性磷抗體包裝5g
鹽納洛 Silicotungstic acid hydrate缺陷性分配同源物α抗體包裝1g
鹽萘唑啉 Silver acetate原鈣粘蛋白1抗體包裝25g
鹽 Silver chloride造血干抗原CD133相關(guān)蛋白抗體包裝5g
鹽帕洛諾司瓊 Silver metavanadate酪蛋白激6/腫瘤激抗體包裝100g
鹽哌侖西平 Silver powder表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體包裝25G
鹽哌羅匹 Sodium 5-nitroguaiacolate原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體包裝1g
鹽哌唑 Sodium benzenesulfinate小鼠抗p21激活激4抗體包裝250mg
穿孔艾耳球蟲(chóng)Eimeria│perforans 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR廣譜角蛋白試劑盒鹽洛沙星;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品胱抑SN試劑盒磺吡啶;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
角磷白鵝膏Amanita│solitania 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,B-Raf突變抑制劑胱抑F試劑盒磺鄰二氧嘧啶;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
鄰苯二酚紫指示劑NGF(Human Nerve growth factor) ELISA kit 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子規(guī)格: 48T
NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta) ELISA kit 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β規(guī)格: 96T
MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β規(guī)格: 48T
MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α規(guī)格: 48T
MIP-1 Beta/CCL4(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Beta) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β規(guī)格: 48T
間苯二酚藍(lán)指示劑