詳細(xì)介紹
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體 |
英文名稱 | A4GNT |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
婁徹氏鏈霉菌 Streptomyces rochei
菌核鏈霉菌 Streptomyces sclerotialus
黑色鏈霉菌 Streptomyces niger
鏈霉菌(加詞待譯) Streptomyces hiroshimensis
委內(nèi)瑞拉鏈霉菌 Streptomyces venezuelae
阿美尼亞鏈霉菌 Streptomyces armeniacus
紅城紅球菌(紅串紅球菌) Rhodococcus erythropolis
赭褐鏈霉菌 Streptomyces umbrinus
披發(fā)糖多孢菌披發(fā)亞種 Saccharopolyspora hirsuta subsp. hirsuta
成紫菌核鏈霉菌(成紫硬塊鏈霉菌) Streptomyces purpurogeneiscleroticus
化鎂孔雀綠肉湯250克MM,RV Medium沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
麥芽浸膏湯200克Malt Extract Broth性罐頭食品無菌試驗(yàn)
腸道菌增菌液250克Enterobacteria Enrichment Broth腸道菌的增菌培養(yǎng)
察氏培養(yǎng)基250克Czapek Dox Agar用于酵母菌的培養(yǎng)
BS瓊250克Bismuth Sulfite Agar用于食品中沙門氏菌的檢驗(yàn)
膽鹽七葉苷疊鈉瓊250克Bile Esculin Azide Agar用于腸球菌的快速選擇性分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
錳營養(yǎng)瓊培養(yǎng)基250克Manganese(II) Nutrient Agar用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗(yàn)
結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡聚糖瓊250克VRBDA腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別
高鹽察氏培養(yǎng)基250克Salt Czapek Dox Agar用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)
察氏蛋白胨培養(yǎng)基250克Czapek Dox Peptone Agar酵母菌的培養(yǎng)
M-腸球菌瓊250克M-Enerococcus Agar用于濾膜法或直接平板法,從自來水、食品或其他標(biāo)本中分離腸球菌
緩沖蛋白胨水增菌液250克BPW沙門氏菌前增菌培養(yǎng)和李氏菌前增菌培養(yǎng)
α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體Sphingomonas sp.分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌培養(yǎng)基: 745生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
肺炎克雷伯氏菌種屬: Klebsila pneumoniae提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物;凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌檢測(cè)芯片培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Shewanla sp.分離基物: 生物樣/比目魚腸道內(nèi)容物提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 共生微生物/比目魚腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/蛋白酶培養(yǎng)基: 33生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pichia membranifaciens提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Hansenula anomala提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀酒生香。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Vibrio sp.分離基物: 蝦病變組織材料提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 598生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Saccharomyces cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 提取海藻糖。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 30~32℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Botryosporium sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)
Tricholoma imbricatum (Fr.) P. Kumm.分離基物: 菌蓋或菌柄提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26存儲(chǔ)條件: 定期移植法
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。