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生化試劑的一些概要:乙酸纖維素薄膜
生化試劑又叫生化藥品,簡稱試劑。它是工農業(yè)、文教衛(wèi)生、科學研究以及國防建設等多方面進行化驗分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標準的各種單質和化合物(也可以是混合物。要進行任何實驗都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對生化試劑的有關知識深入了解,才能安全、順利進行各項實驗。既可保證達到預期實驗目的,又可消除對環(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產品: 乙酸纖維素薄膜
螯合瓊脂糖凝膠FF,螯合Sepharose FF,Chelating Sepharose FF BR 25毫升 2~8℃
重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF,rProtein A Sepharose FF BR 5毫升 2~8℃
5毫升
蛋白A瓊脂糖凝膠CL-4B,ProteinA SepharoseCL-4B BR 1.5克 2~8℃
5毫升
苯基瓊脂糖凝膠6FF(低分辨率),Phenyl Sepharose 6 Fast Flow (low sub) BR 25毫升 2~8℃
100毫升
25毫升
100毫升
苯基瓊脂糖凝膠CL-4B,Phenyl Sepharose CL-4B BR 25毫升 2~8℃
100毫升
25毫升
100毫升
苯基瓊脂糖凝膠6FF(高分辨率),Phenyl Sepharose 6 Fast Flow (High sub) BR 25毫升 2~8℃
100毫升
25毫升
100毫升
藍色瓊脂糖凝膠6FF,Blue Sepharose 6FF BR 25毫升 2~8℃
25毫升
紅色瓊脂糖凝膠6FF,Red Sepharose 6FF BR 25毫升 2~8℃
肝素瓊脂糖凝膠6FF,Heparin Sepharose 6FF BR 25毫升 2~8℃
25毫升
肝素瓊脂糖凝膠CL-6B,Heparin Sepharose CL-6B BR 10克 2~8℃
25毫升
肝素瓊脂糖凝膠CL-4B,Heparin Sepharose CL-4B BR 25毫升 2~8℃
IgG瓊脂糖凝膠6FF,IgG Sepharose 6 FF BR 25毫升 2~8℃
25毫升
瓊脂糖凝膠6FF,Sepharose 6FF 球蛋白分離范圍~4×106 100毫升 2~8℃
葡聚糖(線性分子):~2×106 500毫升
100毫升
500毫升
DEAE瓊脂糖凝膠CL-6B,DEAE Sepharose CL-6B BR 100毫升 57407-08-6 2~8℃
500毫升
100毫升
500毫升
瓊脂糖凝膠CL-6B,Sepharose CL-6B 分離范圍10×103~4×106 100毫升 62610-50-8 2~8℃
500毫升
100毫升
500毫升
瓊脂糖凝膠CL-4B,Sepharose CL-4B 分離范圍70×103~20×106 100毫升 61970-08-9 2~8℃
500毫升
100毫升
500毫升
瓊脂糖凝膠CL-2B,Sepharose CL-2B 分離范圍70×103~40×106 100毫升 65099-79-8 2~8℃
500毫升
100毫升
500毫升
丙烯葡聚糖凝膠S-100 HR,Sephacryl S-100 HR 球蛋白分離范圍1×103~1×105 100毫升 65546-95-4 2~8℃
丙烯葡聚糖凝膠S-200 HR,Sephacryl S-200 High resolution 球蛋白分離范圍5×103~2.5×105;葡聚糖分離范圍1×103~8×104 150毫升 65546-95-4 2~8℃
丙烯葡聚糖凝膠S-300 HR,Sephacryl S-300 High resolution 球蛋白分離范圍1×104~1.5×106;葡聚糖分離范圍2×103~4×105 150毫升 65546-95-4 2~8℃
丙烯葡聚糖凝膠S-400 HR,Sephacryl S-400 High resolution 球蛋白分離范圍2×104~8×106;葡聚糖分離范圍1×104~2×106 150毫升 65546-95-4 2~8℃
丙烯葡聚糖凝膠S-500 HR,Sephacryl S-500 High resolution 葡聚糖分離范圍4×104~2×107 150毫升 65546-95-4 2~8℃
丙烯葡聚糖凝膠S-1000 SF,Sephacryl S-1000 Superfine 葡聚糖分離范圍5×105~1×108 750毫升 2~8℃
藍色葡聚糖2000,蘭色葡聚糖2000,Dextran blue 2000 BR,分子量200萬 1克 87915-38-6 RT
5克
DEAE葡聚糖,DEAE Dextran 高純,分子量50萬 10克 RT
50克
葡聚糖,右旋糖酐,葡聚精,Dextran BR,分子量10萬-20萬 10克 9004-54-0 RT
100克
BR,分子量6.4萬-7.6萬 10克
100克
BR,分子量1萬 10克
100克
葡聚糖T3,葡聚糖D3,右旋糖酐3,Dextran T3 BR,分子量3000 10克 9004-54-0 RT
100克
葡聚糖T4,葡聚糖D4,右旋糖酐4,Dextran T4 BR,分子量4000 10克 9004-54-0 RT
100克
葡聚糖T5,葡聚糖D5,右旋糖酐5,Dextran T5 BR,分子量5000 10克 9004-54-0 RT
100克
葡聚糖T6,葡聚糖D6,右旋糖酐6,Dextran T6 BR,分子量6000 10克 9004-54-0 RT
100克
葡聚糖T7,葡聚糖D7,右旋糖酐7,Dextran T7 BR,分子量7000 10克 9004-54-0 RT
100克
500克
葡聚糖T9,葡聚糖D9,右旋糖酐9,Dextran T9 BR,分子量9000 10克 9004-54-0 RT
100克
500克
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質結合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導的細菌內的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結構相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結合,使阻遏蛋白的空間構像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選。作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍色。常跟IPTG一起用與藍白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對幾乎所有的細胞都有毒性,是穩(wěn)定轉染zui常用的選擇試劑。當neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方后,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以廣泛應用。
6、DMSO:二甲基亞砜。實驗室常用于作液體層析溶劑,同時用作測試物質紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細胞裂解液成分之一,在保護蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對核膜破壞的作用弱,結合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇:一種強還原劑。可還原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結合。使蛋白解離成單個亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過硫酸銨:過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27:一種添加劑,用于神經肝細胞培養(yǎng),被認為具有抑制膠質細胞生長的作用。
16、DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護酶分子上的還原性基團,維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結核分枝桿菌的細胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導產生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結核分枝桿菌的細胞壁成分,可以加強對抗原的抗體反應。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應。
18、吐溫 20:Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80:weenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細胞試劑,制備脫細胞組織工程支架材料。21.PVPP:PVPP對片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES:哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實驗室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學反應,價格比較貴。常用在免疫和細胞類的實驗中,PIPES有時還被用來制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成復合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時,從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復合物與蛋白,多糖類物質分開。zui后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現在實驗室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持pH7.0左右。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質結構中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。27、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應在使用前從貯存液中現用現加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數小時后,可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍:pH指示劑,pH=3.0時呈黃色,pH=4.6時呈藍紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗等。29、臺盼蘭:臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細胞中DNA和RNA結合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個相鄰的堿基對之間,這樣在DNA復制過程中,會使DNA鏈增加或缺失一個堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測定Ca2+時,可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果。可以用前者代替。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強的結合酚類化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復合物,常用于提取RNA時除去酚類。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹慎。36、6-BA:細胞培養(yǎng)中用到,細胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機合成,在蛋白組學中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測序以及酶抑制劑等,蛋白組學級試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長調節(jié)劑??纱龠M細胞分裂,誘導形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計數瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細菌菌落長成紅顏色,對去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。