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詳細介紹
具體步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 大鼠脊髓成纖維細胞 |
組織來源 | 脊髓組織 |
商品貨號 | A01X1719 |
種屬來源 | 大鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞簡介 | 大鼠脊髓成纖維細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結構，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質區(qū)，主要由神經(jīng)細胞構成；在灰質區(qū)周圍為白質區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié)，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的脊髓成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁wan全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持組織的正常形態(tài)；合成和釋放細胞外基質；組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。 |
包被條件 | |
培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
傳代特性 | 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)良好 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通。
原代細胞培養(yǎng)：
原代細胞（Primary cells）：是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞。這里的組織主要指：組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養(yǎng)：由于原代細胞生長緩慢，繁殖一定的代數(shù)停止生長（一般10代以內(nèi)）。所以一般認為：培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠椎間盤髓核細胞 | 巴氏醋桿菌巴氏亞種Acetobacterpasteurianussubsp.PasteurianusDeLeyetFrateur |
小鼠椎間盤纖維環(huán)細胞 | 德氏乳桿菌保加利亞亞種Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus |
小鼠子宮成纖維細胞 | 蘇云金芽孢桿菌猝倒亞種Bacillusthuringiensissubsp.Sotto |
小鼠子宮頸上皮細胞 | 蘇云金芽孢桿菌戈爾斯德變種Bacillusthuringiensisvar.kurstakideBarjacetBonnefoi |
小鼠子宮內(nèi)膜基質細胞 | 蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Bacillusthuringiensissubsp.galleriaeHeimpel |
小鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞 | 枯草芽孢桿菌深黑變種BacillussubtilisVar.aterrimus(LehmannetNeumann)Smithetal. |
小鼠棕色脂肪細胞 | 嗜熱脂肪芽孢桿菌BacillusstearothermophilusDonk |
豬骨髓間充質干細胞 | 日本根霉RhizopusjaponicusVuillemin |
豬主動脈內(nèi)皮細胞 | 中國臺灣根霉RhizopusformosensisNakazawa |
小鼠膽管成纖維細胞 | 裂褶菌Schizophyllum commune Fr. |
小鼠頸動脈內(nèi)皮細胞 | 醋酸菌Acetobacter sp. |
小鼠胎鼠真皮成纖維細胞 | 蘇云金芽孢桿菌BacillusthuringiensisBerliner |
兔頸動脈內(nèi)皮細胞 | 大鼠脊髓成纖維細胞發(fā)根土壤桿菌（發(fā)根植物單胞菌）Agrobacteriumrhizogenes(Rikeretal.)Conn |
人胎盤微血管內(nèi)皮細胞 | 蔥頭伯克氏菌Burkholderiacepacia(palleroni&Holmes)Yabuuchietal. |
兔肺動脈平滑肌細胞 | 解淀粉芽孢桿菌BacillusSubtilis(Ehrenberg)Cohn |
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