詳細介紹
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 |
英文名稱 | BPIL3 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
大鼠腦靜脈血管內(nèi)細胞*培養(yǎng)基100mL
U14-GFP(小鼠子宮頸細胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H596(人肺腺鱗細胞)5×106cells/瓶×2gersion
HeLa全細胞裂解液100μg100μg
A9(小鼠下結(jié)締組織細胞)5×106cells/瓶×2
MIO培養(yǎng)基/動力吲哚鳥氨酸培養(yǎng)基/MIO Medium動力、吲哚和鳥氨酸試驗250克國產(chǎn)/進口
MV3(人黑色素瘤細胞)短小芽胞桿菌 Bacillus pumilus
紫色直絲鏈霉菌 Streptomyces violaceorectus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細胞*培養(yǎng)基JEG-3(人絨毛膜細胞)
TE-11(人食管細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus7.5% NaHCO3溶液
MSC, 小鼠雪旺細胞皺褶假絲酵母 Candida rugosa
鐮刀菌 Fusarium sp.放射形土壤桿菌 Agrobacterium radiobacter
血管抑素(ANG)ELISA Kit for Angiostatin (ANG)規(guī)格:48T/96T
β2-微球蛋白(β2M)ELISA Kit for Beta-Microglobulin (b2M)規(guī)格:48T/96T
牙本質(zhì)涎磷蛋白(DSPP)ELISA Kit for Dentin Sialophosphoprotein (DSPP)規(guī)格:48T/96T
成纖維細胞生長因子21(FGF21)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21)規(guī)格:48T/96T
成纖維細胞生長因子受體4(FGFR4)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor 4 (FGFR4)規(guī)格:48T/96T
葡萄糖6磷異構(gòu)酶(GPI)ELISA Kit for Glucose 6 Phosphate Isomerase (GPI)規(guī)格:48T/96T
生長停滯特異性蛋白6(GAS6)ELISA Kit for Growth Arrest Specific Protein 6 (GAS6)規(guī)格:48T/96T
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand (TRAIL)規(guī)格:48T/96T
視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)ELISA Kit for Retil Binding Protein 4, Plasma (RBP4)規(guī)格:48T/96T
生長分化因子5(GDF5)ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5)規(guī)格:48T/96T
肪轉(zhuǎn)運蛋白5(FATP5)ELISA Kit for Fatty Acid Transport Protein 5 (FATP5)規(guī)格:48T/96T
蛋白激酶Cα(PKCα)ELISA Kit for Protein Kinase C Alpha (PKCa)規(guī)格:48T/96T
殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體Acinetobacter baumannii分離基物: 痰提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 36℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Syntrophomonas erecta分離基物: 污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 989生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pestalotiopsis sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Thalassospira sp.分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 304生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Epicoccum nigrum Link分離基物: 林區(qū)土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Klebsila pneumoniae分離基物: 污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 53生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Thermotogales sp.分離基物: 油井采出液提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)氫產(chǎn)乙醇培養(yǎng)基: 0483生長條件: 65℃
Bacillus sp.分離基物: 油田樣品提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物采油培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃存儲條件: 其他
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。