詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 艾葉探針法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Folium artemisiae argyi |
貨號 | FS-P99210 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
麥康凱肉湯 (CM0005)雷公藤甲素1-叔丁氧羰基-4-哌啶Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗原
麥康凱瓊脂 (CM0007)雷公藤乙素1-叔丁氧羰基-4-哌啶NF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神經(jīng)纖維瘤抗原
蛋白胨水Peptone Water雷公藤紅素Perifosine (KRX-0401)NFATc1 活化T細(xì)胞核因子1蛋白
LAB-LEMCO( ) 肉湯 Lab-Lemco Broth雷公藤內(nèi)酯甲1H-并咪唑-5-羧酸phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 磷酸化細(xì)胞核因子/磷酸化k基因結(jié)合核因子抗原
LAB-LEMCO( ) 瓊脂 Lab-Lemco Agar木犀草素1H-并咪唑-5-羧酸NF-KapBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB) 細(xì)胞核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗原
酵母提取物瓊脂(CM0019)木犀草苷1H-并咪唑-5-羧酸NGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經(jīng)元素3抗原
牛奶瓊脂 (CM0021)沒食子酸3-溴-5-甲氧基甲酸NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6) 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6(多肽)
巰基醋酸鹽培養(yǎng)基(Brewer) (CM0023)蒙花苷3-溴-5-甲氧基甲酸NIT2 (nitrilase family, member 2) NIT2蛋白抗原
MKP-1/DUSP1/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1IgG中心體蛋白954-溴三胺Porcine TLR2 (Toll-Like Receptor 2) 檢測試劑盒
Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1IgG中心體蛋白894-溴三胺Porcine MTF (Microtransferrin) 檢測試劑盒
Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1IgGCERD4蛋白異魯米諾Porcine RI (Ribonuclease Inhibitor) 檢測試劑盒
MKP-2/DUSP4/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2IgGCES1P1蛋白異魯米諾Porcine CaSR (Calcium Sensing Receptor) 檢測試劑盒
MLK3 /FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3IgG羧酸酯酶2三乙基氧四氟酸Porcine MTX (Methotrexate) 檢測試劑盒
Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3IgG羧酸酯酶3三乙基氧四氟酸Porcine α-SMA (α-Smooth muscle actin) 檢測試劑盒
MLCK/FITC 熒光素標(biāo)記肌球蛋白輕鏈激酶IgG羧酸酯酶4A三乙基氧四氟酸Porcine CD3d (Cluster of Differeiation 3d) 檢測試劑盒
Myosin Phosphatase/FITC 熒光素標(biāo)記肌球蛋白磷酸酶IgG羧酸酯酶63,5-二氨基三氟甲Porcine PO2 (Transportin 2) 檢測試劑盒
艾葉探針法PCR鑒定試劑盒卡博替尼蘋果酸鹽 ;XL184(S)-malatePathScan® Total α-Synuclein Sandwich ELISA Kit
Presapogenin CP4Phospho-Talin (Ser425) Antibody
12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrateDi-Methyl-Histone H3 (Lys79) (D15E8) XP® Rabbit mAb
佛波12-十四酸酯13-乙酸酯Di-Methyl-Histone H3 (Lys79) (D15E8) XP® Rabbit mAb
藤黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)DDB-1 Antibody
五味子酚(標(biāo)準(zhǔn)品)p53 (7F5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
宋果靈(華北、一枝蒿庚素)(標(biāo)準(zhǔn)品)Emerin (D9B3) Rabbit mAb
L-gamma-谷氨酰-對-胺Phospho-SHP-2 (Tyr580) (D66F10) Rabbit mAb
FMOC-3,5-二-L-酪氨酸Phospho-SHP-2 (Tyr580) (D66F10) Rabbit mAb
布比卡因堿,丁吡卡因IP6K3 (D9O7J) Rabbit mAb