詳細介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鈣熒光探針Fluo-8, AM
貨號:FSP080
產(chǎn)品規(guī)格:1 mg/5×50 µg/10×50 µg/20×50 µg
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
人鈣結(jié)合蛋白(CR)分析檢測試劑盒Phospho-GSK-3β (Ser9) (D85E12) XP® Rabbit mAb (Pacific Blue<sup>™</sup> Conjugate)100 ul
人脯氨酸羥化酶(PHD)分析檢測試劑盒E4BP4/NFIL3 (D5K8O) Rabbit mAb100 ul
人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)分析檢測試劑盒C-Reactive Protein (D1N1U) Rabbit mAb100 ul
人肺炎支原體抗體(MP-Ab)分析檢測試劑盒NAE1/APPBP1 (D9I4Z) Rabbit mAb100 ul
人肥胖抑制素(Obestatin)分析檢測試劑盒Spi-B (D3C5E) Rabbit mAb100 ul
人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2(TERF2)分析檢測試劑盒NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul
人丁型肝炎病毒抗體(HDV antibody)分析檢測試劑盒TRIM5α (D6Z8L) Rabbit mAb100 ul
人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)分析檢測試劑盒GCKR (D1W9P) Rabbit mAb100 ul
人蛋白ATP1B4(ATP1B4)分析檢測試劑盒Phospho-GSK-3β (Ser9) (D85E12) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
人蛋白 DJ-1(PARK7)分析檢測試劑盒XIAP (D2Z8W) Rabbit mAb100 ul
人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)分析檢測試劑盒NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
人補體片斷4b(C4b)分析檢測試劑盒Spi-B (D4V9S) Rabbit mAb100 ug
人丙酸諾龍/丙酸去甲睪酮(NP)分析檢測試劑盒SRC-1 Blocking Peptide100 ul
人白介素13(IL-13)分析檢測試劑盒Caspase-11 (17D9) Rat mAb100 ul
人α肌動蛋白(α Actin)分析檢測試劑盒TopBP1 (D8G4L) Rabbit mAb100 ul
人αL巖藻糖苷酶(AFU)分析檢測試劑盒Phospho-EGF Receptor (Thr678) Antibody100 ul
人Q熱科克斯體1(Q fever)抗體(IgG)分析檢測試劑盒CD36 (D8L9T) Rabbit mAb100 ug
鈣熒光探針Fluo-8, AMStreptomyces│sp.分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生理活性物質(zhì),次核苷酸脫氫酶抑制活性培養(yǎng)基: CM0038生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)
Bacillus│thuringiensis subsp. japanensis et al.斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 30存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Planomicrobium│sp.分離基物: 水樣/上層海水斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 海洋可培養(yǎng)細菌多樣性培養(yǎng)基: 511生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pleurotus│nebrodensis斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃
Thermoactinomyces│sp.分離基物: 樹根部土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0904生長條件: 55℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Multiclavula│mucida (Pers.) R.H. Petersen分離基物: 石櫟林下斜面培養(yǎng)物模式菌株: yes培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Monascus│anka斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 醬油、腐乳培養(yǎng)基: 17生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Penicillium│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
pleurotus│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法