詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 化橘紅PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Exocarpium citri grandis |
貨號(hào) | FS-P99159 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門(mén)的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
Agar LEVINE-EMB eosine-methylene blue-lactose agar acc.to LEVINE,人星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA1-氟-2-(易制爆)CD46/MCP(membrane cofactor protein)rat, mouse 膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗原
列文EMB 瓊脂/伊紅亞甲藍(lán)乳糖瓊脂人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA1-氟-2-(易制爆)CD5 CD5 多肽抗原
Listeria enrichme broth acc.to FDA 李斯特氏菌富集肉湯人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA3-磺基十四烷基二甲基銨ICAM-2/CD102(iercellular adhesion molecules-2) 細(xì)胞間粘附分子-2抗原
Buffered Listeria Enrichme Broth base acc.to FDA/BAM1955人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA3-磺基十四烷基二甲基銨CD56/NCAM1(Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗原
緩沖李斯特氏菌富集肉湯基礎(chǔ)人小膠質(zhì)細(xì)胞cDNA四癸基溴化銨CD62L (ELAM-1/L-Selectin ) L選擇素抗原
Listeria enrichme broth( base)FDA/IDF-FIL人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNA甲次硫酸 水合物E-Selectin E選擇素抗原
李斯特氏菌富集肉湯(基礎(chǔ))人真皮血管平滑肌細(xì)胞cDNA雙(六氟乙基酮)合鎳(II),水合CD80/B7-1(human) 人刺激分子B7-1蛋白抗原
Listeria selective enrichme suppleme acc.to FDA-BAM 1992人表皮角質(zhì)細(xì)胞cDNA3-氟-4-甲氧基酸CD80/B7-1 刺激分子B7-1蛋白抗原
IL-2/FITC 熒光素標(biāo)記白介素2IgG腦多巴胺神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Amoxicillin SodiumRat TIE-2 (Tyrosine Kinase With Immunoglobulin-Like And EGF-Like Domains 2) 檢測(cè)試劑盒
IL-2/FITC 熒光素標(biāo)記白介素2(人) IgG鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關(guān)蛋白2-(4-溴基)咪唑并[1,2-a]吡啶Rat U-T4 (Ultrasensitivity Thyroxine) 檢測(cè)試劑盒
ITK/PSCTK2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠IL-2誘導(dǎo)型T細(xì)胞激酶IgG膽囊收縮素A受體2-(4-溴基)咪唑并[1,2-a]吡啶Rat U-T3 (Ultrasensitivity Triiodothyronine) 檢測(cè)試劑盒
IL-2R Gamma/FITC 熒光素標(biāo)記白介素2受體γ鏈IgG小腦肽34-溴甲砜Rat NFE2L2 (Nuclear Factor, Erythroid Derived 2 Like Protein 2) 檢測(cè)試劑盒
CD122/IL-2RB/FITC 熒光素標(biāo)記CD122/白介素2受體β鏈IgG周期素依賴性激酶樣54-溴甲砜Rat PLAU/uPA(Urokinase-Type Plasminogen Activator) 檢測(cè)試劑盒
IL-3/FITC (mouse, rat) 熒光素標(biāo)記白介素3IgGα1-chimaerin蛋白4-溴甲砜Rat PLAUR/uPAR (Plasminogen Activator, Urokinase Receptor) 檢測(cè)試劑盒
IL-3R Alpha/CD123/FITC 熒光素標(biāo)記白介素3受體a鏈IgG信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白9復(fù)合體7b2,2′-聯(lián)嘧啶Rat VEGF-B (Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) 檢測(cè)試劑盒
IKI3 family protein/FITC 熒光素標(biāo)記擬南芥IKI3IgG鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白1(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1)2,2′-聯(lián)嘧啶Rat VEGF-C (Vascular Endothelial Cell Growth Factor C) 檢測(cè)試劑盒
化橘紅PCR鑒定試劑盒考馬斯亮藍(lán)R250SUMO-1 Antibody
考馬斯亮藍(lán)G250SUMO-1 Antibody
溴酚藍(lán)FAF1 Antibody
固藍(lán)BPhospho-MST1 (Thr183)/MST2 (Thr180) (E7U1D) Rabbit mAb
氯化硝基四氮唑藍(lán)Claudin-1 Antibody
甲苯胺藍(lán)OClaudin-1 Antibody
阿利新藍(lán)8GXAcinus Antibody
四氮唑藍(lán);BTBrg1 (D1Q7F) Rabbit mAb
噻唑藍(lán);MTTBrg1 (D1Q7F) Rabbit mAb
苯胺藍(lán)(水溶)Wee1 Antibody