詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
ELISA底物緩沖液 | 100ml | FS-R7291 |
儲存條件:4℃,12個月
用途:主要用于ELISA實驗中配制鄰苯二胺(OPD)顯色液與氧化劑(如雙氧水)一起發(fā)生顯色反應
注意事項:主要由磷酸氫er鈉、檸檬酸、防腐劑等組成
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
密歇根克雷伯氏菌滋養(yǎng)層抗原3β7抗體Human SLC16A12 ELISA Kit大鼠D-乳免疫試劑盒
平田頭菇熱休克蛋白-22抗體Human SLC16A3 ELISA Kit大鼠D-甘油3-磷免疫試劑盒
硒砷芽孢桿菌組織H4受體抗體Human SLC16A2 ELISA Kit大鼠D二聚體(D2D)免疫試劑盒
裴氏著色霉羥基類固脫氫11β2抗體Human SLAMF7 ELISA Kit大鼠DNA甲基轉移1(DNMT1)免疫試劑盒
釀酒酵母組織H3受體抗體Human SLC10A3 ELISA Kit大鼠C型鈉尿肽(CNP)免疫試劑盒
瑞山海源菌磷化組蛋白H1抗體Human SLC12A2(Solute carrier family 12 member 2) ELISA Kit大鼠C肽(C-Peptide)免疫試劑盒
圍小叢殼扁圓變種HEATR4蛋白抗體Human SLC12A4 ELISA Kit大鼠C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒
栗疫菌透明質及粘蛋白1抗體Human SIX4 ELISA Kit大鼠CXC趨化因子受體5(CXCR5)免疫試劑盒
新城疫病轉錄因子HES7抗體Human SIX2 ELISA Kit大鼠CXC趨化因子受體4(CXCR4)免疫試劑盒
尖鐮孢古巴專化型宮頸黏液蛋白相關蛋白抗體Human SLC13A4 ELISA Kit大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)免疫試劑盒
玫瑰色紅球菌流感病H3N8血凝抗體Human SKAP2 ELISA Kit大鼠c-ros致癌基因1,受體酪激(ROS1)免疫試劑盒
運動節(jié)桿菌流感病H3N7血凝抗體Human SIX5 ELISA Kit大鼠Coronin-1A(Coro1a/Coro1)免疫試劑盒
Rhizobium multihospitium流感病H3N1血凝抗體Human SKIL ELISA Kit大鼠c-jun 免疫試劑盒
黑曲霉同源盒蛋白HoxB3抗體Human SIX4 ELISA Kit大鼠c-fos 免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型遺傳性血色病蛋白相關蛋白1抗體Human SIX5 ELISA Kit大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷3磷脂酰轉移,線粒體(PGS1)免疫試劑盒
紋黑蛋巢甘油吸收/轉運蛋白GUP1抗體Human SKAP2 ELISA Kit大鼠CDCP1 免疫試劑盒
涅斯捷連科氏菌Nesterenkonia│sp. 質量規(guī)格:10μg/ml,u=4%科羅索
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 質量規(guī)格:分析標準品,99%草質苷
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質量規(guī)格:分析標準品,97.5%異鼠李-3-O-葡萄糖苷
ELISA底物緩沖液TRH ELISA Kit 大鼠促jia狀腺su釋放激su規(guī)格: 48T
ATGA/TGAB ELISA Kit 大鼠抗jia狀腺球蛋白規(guī)格: 48T
CRH ELISA Kit 大鼠促腎上皮質激su釋放激su規(guī)格: 48T
GnRH ELISA Kit 大鼠促性腺激su釋放激su規(guī)格: 48T
LTB4 ELISA Kit 大鼠白三烯B4規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。