Fluo-3五鉀鹽實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格	貨號(hào)
Fluo-3五鉀鹽	1 mg	FSP078

產(chǎn)品特點(diǎn):
靈敏度高：產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號(hào)強(qiáng)
?
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
?
使用方法：
注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠凝血因子Ⅶ（FⅦ）分析檢測(cè)試劑盒Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb (IHC Formulated)100 ul

小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體（EMAb）分析檢測(cè)試劑盒N-Cadherin (13A9) Mouse mAb100 ul

小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體（pANCA）分析檢測(cè)試劑盒CYP11A1 (D8F4F) Rabbit mAb100 ul

小鼠抗線(xiàn)粒體ADP/ATP載體（AAC）抗體分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Biotinylated)100 ul

小鼠抗平滑肌抗體（ASMA）分析檢測(cè)試劑盒Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb20 ul

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白5（MIP-5）分析檢測(cè)試劑盒Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb100 ul

小鼠解脲脲原體抗體（UU-Ab）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Rad50 (Ser635) Antibody100 ul

小鼠骨成型蛋白7（BMP-7）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul

小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG（GAD-Ab-IgG）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (PE Conjugate)1 Kit

小鼠促卵泡素（FSH）分析檢測(cè)試劑盒SimpleChIP® Chromatin IP Buffers100 ul

小鼠白介素11（IL-11）分析檢測(cè)試劑盒UBE2C Antibody100 ul

小鼠β-防御素3 分析檢測(cè)試劑盒Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)5 mg

小鼠FMS樣酪氨酸激酶3（Flt3）分析檢測(cè)試劑盒Perifosine100 ul

小鼠FAM172A蛋白（FAM172A）分析檢測(cè)試劑盒TAB3 (D5J7D) Rabbit mAb100 ul

小鼠E3泛素蛋白連接酶TRIM68（TRIM68）分析檢測(cè)試劑盒FANCB (D9W6S) Rabbit mAb100 ul

小鼠CD34分子（CD34）分析檢測(cè)試劑盒PLCbeta3 (D9D6S) Rabbit mAb300 ul

豚鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（MIF）分析檢測(cè)試劑盒SignalSilence® Tyk2 siRNA I5 mg
Fluo-3五鉀鹽Enterococcus│faecium分離基物: 奶粉凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Aspergillus│niger var. niger Tiegh.分離基物: 胡楊斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Chaetomium│cochliodes分離基物: 植物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Lactococcus│lactis subsp. lactis分離基物: 酸奶凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0005生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Saccharomyces│sp.凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 312生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Aspergillus│asperescens分離基物: 朽木凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生果膠酶培養(yǎng)基: 0015生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Sporothrix│inusitatiramosa凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Lactococcus│lactis分離基物: 乳汁凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究分析培養(yǎng)基: 55生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Bacillus│pumilus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0003生長(zhǎng)條件: 35-37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線(xiàn)性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線(xiàn)性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。