詳細介紹
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 木瓜染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Fructus chaenomelis |
貨號 | FS-P99251 |
優(yōu)點:
(1)操作簡單,LAMP核酸擴增是在等溫條件下進行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴增只需要在反應體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因為不需要預先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴增至109倍,達0.5 mg/mL.應用專門的濁度儀可以達到實時定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設計的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進行核酸擴增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴增模板可達幾個拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結(jié)果。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
APNG/MPG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶秦皮苷; 白蠟樹苷3- 巰基酸正酯HSP-90Alpha(Heat Shock Protein 90Alpha ) 熱休克蛋白90α(抗原)
APOD 載脂蛋白D奇任,奇壬2-氯-5-甲(易制爆)HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β (抗原)
APOH 載脂蛋白H高良姜素2-氯-5-甲(易制爆)IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 腫瘤細胞凋亡ASPP家族的另一個成員(抗原)
APOE 載脂蛋白E比枯枯靈;畢靈堿;荷包牡丹堿2-氯-5-甲(易制爆)CD54/ICAM-1 細胞間粘附分子-1
APOJ 載脂蛋白J異槲皮苷4-氯-2-三氟基異酸酯IL-1 Beta(Ierleukin-1 Beta) 白介素1β(白細胞介素-1β)(多肽抗原)
Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇靈堿3-(二基膦基)胺IL1RAPL1 (Ierleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白(抗原)
APP/ABPP 淀粉樣肽前體蛋白三葉豆紫檀苷3-(二基膦基)胺IL-6(Ierleukin-6) 白介素6(白細胞介素-6)(多肽抗原)
APP/ABPP APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白苷(R)-(+)-碳酸烯酯IL-10(Ierleukin-10) 白介素10(白細胞介素-10)(抗原)
軸突相關(guān)CP2蛋白(少突膠質(zhì)細胞)5-氟-8-羥基喹啉Porcine MYH9 (Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle) 檢測試劑盒
酪蛋白激酶δ15-氟-8-羥基喹啉Porcine MK (Midkine) 檢測試劑盒
活化白細胞粘附分子二對甲磺酸拉帕替尼(GW-572016)Porcine CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) 檢測試劑盒
1號染色體開放閱讀框1912'-甲氧基肌苷Porcine TSPAN30 (Tetraspanin 30) 檢測試劑盒
柯薩奇病A16型聚合酶3DD-(+)-纖維四糖Porcine RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B) 檢測試劑盒
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子N,N',N''-三乙酰基殼三糖Porcine GAL9 (Galectin 9 ) 檢測試劑盒
細胞角蛋白161-(4-)哌鹽酸鹽Porcine SA (Sialic Acid) 檢測試劑盒
4號染色體開放閱讀框17甲氧基乙酰氯Porcine OPN (Osteopoin) 檢測試劑盒
木瓜染料法PCR鑒定試劑盒匹莫苯丹GATA-3 (D13C9) XP® Rabbit mAb
2-氨基-4'-氟二苯甲酮HO-1 (D60G11) Rabbit mAb
2-氨基-4'-氯二苯甲酮WTX (D38E5) Rabbit mAb
原百部堿(標準品)Bmi1 (DC9) Mouse mAb
雪上一枝蒿甲素Bmi1 (D42B3) Rabbit mAb
麥冬皂苷D' DBC1 (3G4) Mouse mAb
糠胺,2-呋喃CD133 (A3G6K) Rabbit mAb
芐氟噻FoxA1/HNF3α (D7P9B) Rabbit mAb
蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標準品)NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb
黃鐘花醌;拉帕 (標準品)NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb