詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 細胞分裂周期相關蛋白5抗體 |
英文名稱 | CDCA5 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
米氮平標準品Rat Endothelin-1 ELISA Kit純度:0.988
敏諾西代標準品Rat endotoxin ELISA Kit純度:0.997
鹽二甲四環(huán)素標準品Rat endotoxin ELISA Kit純度:0.982
礦物油標準品Rat Follistatin ELISA Kit純度:0.987
米力農(nóng)標準品Rat Follistatin ELISA Kit純度:0.99
米爾貝肟標準品Rat CA125 ELISA Kit純度:0.997
美服培標準品Rat CA125 ELISA Kit純度:0.998
Chicken α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit 雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130404-200209雜質檢查4-差向金霉素規(guī)格:50mg
Chicken Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130405-200405雜質檢查β-多西環(huán)素規(guī)格:50mg
Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit 雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T130407-200707含量測定頭孢噻吩規(guī)格:150mg
Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit 雞L氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 進口/原裝規(guī)格:96T/48T130408-200710含量測定頭孢氨芐規(guī)格:200mg
Chicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit 雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T130409-201011含量測定阿莫西林規(guī)格:100mg
Chicken factor B,BF ELISA Kit 雞B因子(BF)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T130410-200706含量測定氨芐西林規(guī)格:100mg
細胞分裂周期相關蛋白5抗體G蛋白αS抗體(鳥嘌呤核苷結合蛋白Gα s)2-Ami-naphthalenesulfonic acid別名: 分子式: C10H9NO3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
G蛋白β4抗體/鳥嘌呤核苷結合蛋白β亞基42-Amino-4-hydroxy-6-methylpyrimidine別名: 分子式: C5H7N3O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
G蛋白β2抗體/鳥嘌呤核苷結合蛋白β亞基22-Amino-4-methylbenzothiazole別名: 分子式: C8H8N2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
G蛋白γ2抗體/鳥嘌呤核苷結合蛋白γ2抗體2-Amino-6-methoxybenzothiazole別名: 分子式: C8H8N2OS性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
磷化糖原合酶激酶3β抗體2-Amino-6-methylbenzothiazole別名: 分子式: C8H8N2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
G蛋白偶聯(lián)受體GPR92蛋白抗體6-Ami-naphthalenesulfonic acid別名: 分子式: C10H9NO3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
己糖6磷脫氫酶抗體D-(-)-threo-2-Ami-(4-nitrophenyl)-1,3-propanediol別名: 分子式: C9H12N2O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
G蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體4-Amino-3-nitrobenzophenone別名: 分子式: C13H10N2O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: