詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 4號染色體開放閱讀框29抗體 |
英文名稱 | C4orf29 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
愈創(chuàng)木磺標準品Human 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA KIT純度:0.99
葡萄糖標準品Human 8-hydroxy-2-deoxyguasine ELISA Kit純度:0.998
檸檬標準品Human 6-keto-prostaglandin elisa kit純度:0.999
標準品Human Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit純度:0.994
碳標準品Human 25(OH)D3 ELISA Kit純度:0.995
酒石氫標準品Human 25-HVD ELISA Kit純度:0.996
碳氫標準品Human17-KS ELISA KIT純度:0.998
Guinea Pig Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T111770-200701檢查金胺O規(guī)格:20mg
guinea pig Histamine,HIS ELISA Kit豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒進口/原裝規(guī)格:96T/48T111771-200701檢查胭紅 規(guī)格:20mg
guinea pig transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit 豚鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T111772-200701檢查赤蘚紅規(guī)格:20mg
Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T111773-200701檢查酸性紅73規(guī)格:20mg
Guinea pig Growth hormone,GH ELISA Kit豚鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒 進口/分裝規(guī)格:96T/48T111774-200701含量測定月桂酸規(guī)格:20mg
guinea pig Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒進口/原裝規(guī)格:96T/48T111775-200701鑒別苷規(guī)格:20mg
4號染色體開放閱讀框29抗體磷化gp130抗體Aspirin別名: 分子式: C9H8O4性狀: Powder純度: 99.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
谷胱甘肽S轉移酶ζ1抗體Aminophenazone別名: 分子式: C13H17N3O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
甘-N-酰基轉移酶抗體Indometacin別名: 分子式: C19H16ClNO4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
甘-N-?;D移酶樣1抗體Naproxen別名: 分子式: C14H14O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
轉運蛋白G3PP抗體Dexamethasone 21-phospha disodium salt別名: 分子式: C22H30FO8P性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
磷化葡萄糖合成酶1抗體Folic acid別名: 分子式: C19H19N7O6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
糖原蛋白1Chlorpheniramine malea別名: 分子式: C20H23ClN2O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白抗體Amprolium hydrochloride別名: 分子式: C14H20Cl2N4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: