詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 細胞周期后期促進蛋白亞基11抗體 |
英文名稱 | APC11 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
磺米隆相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Mafenide Related Compound A
維司群系統(tǒng)適用性用混合物標準品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
釓雙相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
釓雙相關(guān)物質(zhì)B標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
釓弗塞相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:
氫加蘭他敏相關(guān)物質(zhì)混合物標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
更昔韋1N基纈標準品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
加替沙星標準品 規(guī)格:300mg 英文名稱:Gatifloxacin
姜素混合物標準品 規(guī)格:0.2mg 英文名稱:Ginger Constituent Mixture
生姜粉標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Powdered Ginger
人參皂甙Rd 進口、國產(chǎn) GinsesideRd 含量:色固
人參皂甙Re 進口、國產(chǎn) GinsesideRe 含量:BR
人參皂甙Rf 進口、國產(chǎn) GinsesideRf 含量:色固
人參皂甙Rg1 進口、國產(chǎn) GinsesideRg1 含量:BR
人參皂甙Rg2 進口、國產(chǎn) GinsesideRg2 含量:BR
人參皂甙Rg3 進口、國產(chǎn) GinsesideRg3 含量:BR
人參皂甙Rh1 進口、國產(chǎn) GinsesideRh1 含量:BR
人參皂甙Rh2 進口、國產(chǎn) GinsesideRh2 含量:油浴,180℃
人纖維蛋白溶酶 進口、國產(chǎn) Fibrilysin 含量:BR,5u/ul,99%
人血白蛋白 進口、國產(chǎn) HAS 含量:USP級,0.1u/mg
細胞周期后期促進蛋白亞基11抗體Roseovarius sp.分離基物: 水樣/深海底層水樣提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機污染物降解菌/分離自多環(huán)芳烴(PAHs)富集菌群培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bradyrhizobium japonicum分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于分類學(xué)研究培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
赭綠青霉種屬: Penicillium ochrochloron安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 耐21%CuSO4培養(yǎng)基: Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。121℃,15min。生長條件: 25-26℃,好氧
球形賴氨酸芽孢桿菌種屬: Lysinibacillus sphaericus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 殺蟲范圍: 庫蚊培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pasteurla multocida分離基物: 不清楚提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 56生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Natronorubrum aibiense分離基物: 鹵水及底泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 基礎(chǔ)理論及應(yīng)用研究培養(yǎng)基: 0926生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Auricularia auricula-judae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
Nocardiopsis sp.分離基物: 鹽堿土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 331生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法