詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 9號染色體開放閱讀框62抗體 |
英文名稱 | C9orf62 |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
低氧誘導因子1α(HIF1α)重組蛋白英文名稱:Recombinant Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a)
蛋白激酶R(PKR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase R (PKR)
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯TSB-YE 規(guī)格: 250g 用途: 廣泛用于細菌的培養(yǎng),特別用于食品中李斯特氏菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010和SN0184-2005,ISO標...
人肝動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
克氏鐵瓊脂斜面平板/KIA Plate10支國產(chǎn)/進口
黑化大家鼠肺成纖維樣細胞英文名稱:NRL2
A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2
纖維介素蛋白(FGL2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fibrigen Like Protein 2 (FGL2)
叉框蛋白O1(FOXO1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Forkhead Box Protein O1 (FOXO1)
中國藍瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于沙門氏菌的前增菌培養(yǎng)(GB4789.4-2010 ,GB4789.40-2010,SN0170-92和GB13091-91,ISO標準)...
人胰腺上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
卵磷脂(大豆)/大豆卵磷脂/磷脂酰膽堿/L-a-磷脂酰膽酰/蜂王漿/SPCBR,PC=26%250/25/100/1000克國產(chǎn)/進口
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽糖蔗糖瓊脂/DCLS瓊脂/DCLS Agar致病性腸桿菌的分離250克國產(chǎn)/進口
環(huán)磷鳥苷(cGMP)ELISA Kit for Cyclic Guasine Mophosphate (cGMP)規(guī)格:48T/96T
抗PL7抗體(Anti-PL7)ELISA Kit for Anti-PL7 Antibody規(guī)格:48T/96T
60kD熱休克蛋白(HSPD1)ELISA Kit for Heat Shock 60kD Protein 1, Chaperonin (HSPD1)規(guī)格:48T/96T
胱天蛋白酶8(CASP8)ELISA Kit for Caspase 8 (CASP8)規(guī)格:48T/96T
己糖激酶1(HK1)ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1)規(guī)格:48T/96T
粘蛋白4(MUC4)ELISA Kit for Mucin 4 (MUC4)規(guī)格:48T/96T
凝血酶/抗凝血酶復合體(TAT)ELISA Kit for Thrombin/Antithrombin Complex (TAT)規(guī)格:48T/96T
抗增殖細胞核抗原(PCNA)ELISA Kit for Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA)規(guī)格:48T/96T
核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)ELISA Kit for Nuclear Receptor Subfamily 3, Group C, Member 1 (NR3C1)規(guī)格:48T/96T
肌紅蛋白(MYO)ELISA Kit for Myoglobin (MYO)規(guī)格:48T/96T
成纖維細胞生長因子23(FGF23)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23)規(guī)格:48T/96T
抗肝腎微粒體抗體(Anti-LKMA)ELISA Kit for Anti-Liver/Kidney Microsomal Antibody (Anti-LKMA)規(guī)格:48T/96T
9號染色體開放閱讀框62抗體200mg(AA)含量測試盒 微量法9012-36-6486-35-196T淀酶γ(Amyγ)HPLC≥98%顆粒體蛋白檢測試劑盒20mgCYT Ab13614-98-7化學試劑沉默調(diào)節(jié)蛋白7(SIRT7)100mg還原型谷胱甘肽(GSH)測試盒 (可見光分光光度法)9012-36-619492-03-696T唾淀酶α1(AMY1)HPLC≥98%顆粒溶素檢測試劑盒20mgENK13614-98-7化學試劑Vav2癌(VAV2)
100mg還原型谷胱甘肽(GSH)測試盒 (可見光分光光度法)9012-36-619492-03-696T唾淀酶α1(AMY1)HPLC≥98%顆粒溶素檢測試劑盒20mgENK13614-98-7化學試劑Vav2癌(VAV2)200mg還原型谷胱甘肽(GSH)測試盒 (微量法)9012-36-62445-80-996T組織子通道抑制子(TFPI)HPLC≥98%顆粒酶H檢測試劑盒20mgBNP82419-36-1化學試劑Vav3癌(VAV3)
200mg還原型谷胱甘肽(GSH)測試盒 (微量法)9012-36-62445-80-996T組織子通道抑制子(TFPI)HPLC≥98%顆粒酶H檢測試劑盒20mgBNP82419-36-1化學試劑Vav3癌(VAV3)100mg半胱(Cys)含量 可見分光光度法9012-36-6212701-97-896T組織子通道抑制子(TFPI)HPLC≥98%顆粒酶B檢測試劑盒5mgET82419-36-1化學試劑Arkadia蛋白(ARK)
100mg半胱(Cys)含量 可見分光光度法9012-36-6212701-97-896T組織子通道抑制子(TFPI)HPLC≥98%顆粒酶B檢測試劑盒5mgET82419-36-1化學試劑Arkadia蛋白(ARK)200mg半胱(Cys)含量 微量法9012-36-6866366-86-196T脂酶A2激活蛋白(PLAA)HPLC≥98%顆粒酶A檢測試劑盒5mgEndoCAb82419-36-1化學試劑抑絲蛋白3(PFN3)
200mg半胱(Cys)含量 微量法9012-36-6866366-86-196T脂酶A2激活蛋白(PLAA)HPLC≥98%顆粒酶A檢測試劑盒5mgEndoCAb82419-36-1化學試劑抑絲蛋白3(PFN3)200mg海藻糖含量檢測試劑盒 可見分光光度法9012-36-6126105-12-296T脂酶A2激活蛋白(PLAA)HPLC≥98%柯薩奇病毒腺病毒受體檢測試劑盒20mgEG-VEGF1397-89-3化學試劑抑絲蛋白2(PFN2)