詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 神經(jīng)母細(xì)胞瘤源性分泌蛋白抗體 |
英文名稱 | C1orf76 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
宛氏擬 Paecilomyces variotii玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基
MDA231/腺細(xì)胞人胃細(xì)胞(未分化)
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sirhizobium fredii串珠鐮孢 Fusarium moniliforme
桃紅平菇 Pleurotus salmoneostramineus嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
阿布拉鏈霉菌除瘟變種 Streptomyces aburaviensis var. ablastmyceticus金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞小鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiSP2/0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)
酒假絲酵母 Candida kefyrIV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)
含鈀蛋白(PALLD)ELISA Kit for Palladin (PALLD)規(guī)格:48T/96T
GDP解離抑制因子1(GDI1)ELISA Kit for GDP Dissociation Inhibitor 1 (GDI1)規(guī)格:48T/96T
白介素28A(IL28A)ELISA Kit for Interleukin 28A (IL28A)規(guī)格:48T/96T
干擾素調(diào)節(jié)因子4(IRF4)ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 4 (IRF4)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1)ELISA Kit for Neuregulin 1 (NRG1)規(guī)格:48T/96T
Salusinα蛋白(Salusinα)ELISA Kit for Salusin Alpha規(guī)格:48T/96T
AMP激活蛋白激酶α1(PRKAα1)ELISA Kit for Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1 (PRKAa1)規(guī)格:48T/96T
心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)ELISA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)規(guī)格:48T/96T
糖蛋白M6A(GPM6A)ELISA Kit for Glycoprotein M6A (GPM6A)規(guī)格:48T/96T
載蛋白A4(APOA4)ELISA Kit for Apolipoprotein A4 (APOA4)規(guī)格:48T/96T
白介素5(IL5)ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5)規(guī)格:48T/96T
肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)ELISA Kit for Myosin Light Chain Kinase (MYLK)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)母細(xì)胞瘤源性分泌蛋白抗體0.27mlDextran T-10 葡聚糖 T-1029915-38-6146-48-596T表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白D(SPD)HPLC≥98%肝細(xì)胞生長子檢測試劑盒20mgPDGF-αR123334-07-6化學(xué)試劑Palmdphin蛋白(PALMD)200mgDextran T-40 葡聚糖 T-4091000-53-293-14-196T波形蛋白(VIM)HPLC≥98%肝細(xì)胞核子1β檢測試劑盒20mgPDGFRβ65-71-4化學(xué)試劑核糖咪唑羧化酶(PAICS)
200mgDextran T-40 葡聚糖 T-4091000-53-293-14-196T波形蛋白(VIM)HPLC≥98%肝細(xì)胞核子1β檢測試劑盒20mgPDGFRβ65-71-4化學(xué)試劑核糖咪唑羧化酶(PAICS)10mgDextran T-40 葡聚糖 T-4091000-53-290-05-196T玻連蛋白(VTN)HPLC≥98%肝素-血小板子4復(fù)合物抗體檢測試劑盒20mgPDGFR65-71-4化學(xué)試劑耐化性能蛋白1(OXR1)
10mgDextran T-40 葡聚糖 T-4091000-53-290-05-196T玻連蛋白(VTN)HPLC≥98%肝素-血小板子4復(fù)合物抗體檢測試劑盒20mgPDGFR65-71-4化學(xué)試劑耐化性能蛋白1(OXR1)125mgDextran T-70 葡聚糖 T-7091000-53-2611-40-596T膽囊收縮素八肽(CCK8)HPLC≥98%肝素結(jié)合EGF樣生長子檢測試劑盒20mgPDGF65-71-4化學(xué)試劑卵質(zhì)酶2(OVCH2)
125mgDextran T-70 葡聚糖 T-7091000-53-2611-40-596T膽囊收縮素八肽(CCK8)HPLC≥98%肝素結(jié)合EGF樣生長子檢測試劑盒20mgPDGF65-71-4化學(xué)試劑卵質(zhì)酶2(OVCH2)200mgDextran T-70 葡聚糖 T-7068399-81-5548-77-696T蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)HPLC≥98%肝素輔子II-凝血酶檢測試劑盒20mgPDGF-D65-71-4化學(xué)試劑卵質(zhì)酶1(OVCH1)
200mgDextran T-70 葡聚糖 T-7068399-81-5548-77-696T蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)HPLC≥98%肝素輔子II-凝血酶檢測試劑盒20mgPDGF-D65-71-4化學(xué)試劑卵質(zhì)酶1(OVCH1)20mgDextran T-500 葡聚糖 T-50068399-81-5130-86-996T1,5-脫水葡萄糖醇(1,5-AG)HPLC≥98%肝素輔子Ⅱ檢測試劑盒20mgCIC66-22-8化學(xué)試劑耳錨蛋白(OTOA)