詳細(xì)介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:5(6)-羧基羅丹明6G琥珀酰亞胺酯(混合物)
貨號(hào):FSP118
產(chǎn)品規(guī)格:10 mg
分類:熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
人40S核糖體蛋白S19(RPS19)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-IKKα (Ser176)/IKKβ (Ser177) (C84E11) Rabbit mAb100 ul
人17羥孕酮(17-OHP)分析檢測(cè)試劑盒Miwi (G82) Antibody100 ul
人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)分析檢測(cè)試劑盒Cyclin E1 (D7T3U) Rabbit mAb100 ul
牛血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)分析檢測(cè)試劑盒CHIP (C3B6) Rabbit mAb100 ul
綿羊成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF23)分析檢測(cè)試劑盒La Antigen Antibody100 ul
馬白介素8(IL-8/CXCL8)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Raptor (Ser792) Antibody20 ul
雞多巴(DA)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Raptor (Ser792) Antibody100 ul
雞促甲狀腺素(TSH)分析檢測(cè)試劑盒EGF Receptor (E746-A750del Specific) (D6B6) XP® Rabbit mAb100 ul
雞觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)分析檢測(cè)試劑盒Axin1 (C76H11) Rabbit mAb20 ul
雞白介素15(IL-15)分析檢測(cè)試劑盒Axin1 (C76H11) Rabbit mAb100 ul
大鼠抗胰蛋白酶(AT)分析檢測(cè)試劑盒LEDGF (C57G11) Rabbit mAb100 ul
大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)抗體分析檢測(cè)試劑盒MCF2/Dbl Antibody100 ul
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)分析檢測(cè)試劑盒CDK7 Antibody100 ul
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) 分析檢測(cè)試劑盒Centrin-2 Antibody100 ul
大鼠甘露糖寡糖1SCF (C19H6) Rabbit mAb100 ul
大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)分析檢測(cè)試劑盒HMGCS2 (D3U1A) Rabbit mAb100 ul
大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)分析檢測(cè)試劑盒Rab7 Antibody100 ul
5(6)-羧基羅丹明6G琥珀酰亞胺酯(混合物)Pseudomonas│stutzeri分離基物: 沉積物/深海沉積物凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物轉(zhuǎn)化微生物/反硝化菌(單菌驗(yàn)證),可用于生物脫氮研究,去除養(yǎng)殖水體富營(yíng)養(yǎng)化;產(chǎn)酶微生物/淀粉酶、脂酶(三丁酸甘油酯)培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Alcanivorax│venustensis分離基物: 水樣/表層海水凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus thuringiensis Berliner凍干管安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 殺鱗翅目昆蟲培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧。存儲(chǔ)條件: 2-8℃
Streptomyces│globisporus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0011生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces│sp.分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
Alternaria│citri分離基物: 枯葉斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生真菌毒素培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Theileria│sergenti分離基物: 血液其他安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于免疫疫苗和診斷試劑的研制,教學(xué)標(biāo)本片的制作,用模式蟲種的制備和提供,蟲種的分類鑒定和一些分析檢測(cè)技術(shù)的研究.培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;
O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae O1凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: O1/eltor 稻葉(Inaba)培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Streptomyces│violaceus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法